STC-1在新生奶牛腎臟和十二指腸中的表達(dá)和定位研究.pdf

1、斯鈣素-1(STC-1)是一種最早在硬骨魚(yú)特有的斯坦尼氏小體發(fā)現(xiàn)的多肽類(lèi)激素,后來(lái)在人和多種哺乳動(dòng)物體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)STC-1的基因表達(dá)并有一些蛋白定位的報(bào)道。STC—1參與鈣磷代謝,抑制鈣的吸收和促進(jìn)磷酸鹽的吸收、重吸收,抑制磷酸鹽的排泄。在分子和組織水平探索STC-1在奶牛體內(nèi)的表達(dá),對(duì)研究奶牛鈣磷代謝的機(jī)理具有重要的意義,同時(shí)為探索防治奶牛鈣磷代謝病提供新的思路。
　　 為從基因水平檢測(cè)在中華荷斯坦奶牛腎臟和十二指腸中是否有ST

2、C-1基因的表達(dá),本試驗(yàn)選擇1日齡中華荷斯坦?fàn)倥?通過(guò)提取試驗(yàn)?zāi)膛ＤI臟和十二指腸組織的總RNA,建立PCR反應(yīng)體系,克隆STC-1 cDNA的部分序列。結(jié)果顯示,STC—1基因在中華荷斯坦奶牛腎臟和十二指腸組織中有表達(dá)。將所克隆的STC-1 cDNA序列連接T載體、轉(zhuǎn)化、測(cè)序。同源分析顯示與Bos taurus的STC—1基因相應(yīng)序列的核苷酸序列同源性達(dá)到100％。
　　 在鈣磷代謝過(guò)程中,十二指腸是鈣和磷的最重要的吸收部位,而

3、腎臟是重要的重吸收和排泄的器官。為探索STC-1蛋白在奶牛鈣磷代謝中的生理作用,本試驗(yàn)運(yùn)用免疫組化技術(shù)對(duì)STC-1蛋白在1日齡中華荷斯坦?fàn)倥ＤI臟和十二指腸的分布進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示在腎臟的近曲小管和遠(yuǎn)曲小管上皮細(xì)胞有明顯的棕黃色陽(yáng)性染色,主要集中在上皮細(xì)胞的胞漿內(nèi),十二指腸的腸腺和杯狀細(xì)胞也呈現(xiàn)出明顯的棕黃色；運(yùn)用原位雜交技術(shù)對(duì)STC-1 mRNA在腎臟和十二指腸進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示在奶牛腎臟的近端小管和皮質(zhì)升支粗段有明顯的雜交信號(hào),在遠(yuǎn)端