替米沙坦對長期HSHF膳食喂養(yǎng)大鼠腎臟的影響與機制探討.pdf

1、目的：
　　1．觀察替米沙坦對長期高糖高脂（high sugar and high fat，HSHF）膳食喂養(yǎng)大鼠腎臟形態(tài)的影響。
　　2．觀察替米沙坦對長期HSHF膳食喂養(yǎng)大鼠腎臟中巨噬細胞數(shù)量和極化的影響，探討替米沙坦是否可經(jīng)由此途徑發(fā)揮其早期的腎臟保護作用。
　　方法：
　　32只6-8周齡健康雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機分成兩組：正常對照組，8只；高糖高脂組（HSHF組），24只。喂養(yǎng)6個月后HSHF

2、組隨機分為3個亞組：HSHF組，8只；HSHF對照組，8只；替米沙坦干預組，8只。正常對照組給予正常飼料喂養(yǎng)；HSHF組給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)（飼料配方為：70％正常飼料+20%豬油+10%蔗糖+1%膽固醇+0.25%膽酸）；替米沙坦干預組給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)，替米沙坦5mg/kg.d灌胃；HSFH對照組給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)，等體積的生理鹽水灌胃。
　　替米沙坦干預3個月后，各組大鼠禁食8小時后腹腔注射烏拉坦（4ml/kg）麻醉，處

3、死后于無菌條件下摘取雙腎組織。左腎組織用10%中性甲醛固定做石蠟切片，用于PAS染色和免疫組化，右腎組織快速投放于液氮中，用于Western Blot檢測。PAS染色光鏡下觀察腎臟病理改變，運用免疫組化方法檢測腎臟組織中CD68+巨噬細胞的浸潤情況，運用WesternBlot檢測腎臟組織中足細胞相關(guān)蛋白podocin、M1型巨噬細胞標志物誘導型氮氧化合物（iducible nitric oxide synthase，iNOS）和M2型巨

4、噬細胞特異性標志物精氨酸酶-1（arginase-1，Arg-1）蛋白的表達水平。
　　結(jié)果：
　　1．HSHF膳食喂養(yǎng)9個月后，與正常對照組相比，HSHF組大鼠腎小球基底膜增厚，系膜基質(zhì)增生，腎臟CD68+巨噬細胞浸潤數(shù)量增加；腎臟足細胞相關(guān)蛋白podocin、腎臟Arg-1蛋白表達水平顯著下降，腎臟iNOS蛋白表達水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
　　2．HSHF膳食喂養(yǎng)9個月后，與HSHF組相比，

5、HSHF對照組大鼠腎小球基底膜厚度、系膜基質(zhì)增生程度，腎臟CD68+巨噬細胞浸潤數(shù)量，腎臟足細胞相關(guān)蛋白podocin、腎臟Arg-1蛋白及腎臟iNOS蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。
　　3．替米沙坦干預3個月后，與HSHF對照組相比，替米沙坦干預組大鼠腎小球系膜基質(zhì)增生程度減輕，腎臟CD68+巨噬細胞浸潤數(shù)量下降；腎臟足細胞相關(guān)蛋白podocin、腎臟Arg-1蛋白表達水平顯著增高，腎臟iNOS蛋白表達水平顯著降