骨關(guān)節(jié)炎中Wnt-β-catenin信號(hào)通路調(diào)控骨橋蛋白表達(dá)的初步研究.pdf

1、目的：明確骨關(guān)節(jié)炎中骨橋蛋白的表達(dá)是否受到Wnt/β-catenin信號(hào)通路中β-catenin/TCF-4復(fù)合體調(diào)控，并探討其相關(guān)調(diào)控機(jī)理，為尋找防治OA的安全有效的靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。
　　 方法：體外培養(yǎng)人OA軟骨細(xì)胞和正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，1、RealTime-PCR檢測β-catenin和OPN在第一代OA和正常軟骨細(xì)胞中的mRNA表達(dá)水平；2、取第二代OA軟骨細(xì)胞，分為實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組，Wnt/β-catenin信號(hào)通路

2、負(fù)性調(diào)節(jié)因子DKK-1下調(diào)實(shí)驗(yàn)組β-catenin表達(dá)后，Real Time-PCR和Western Blot檢測OPN mRNA和蛋白表達(dá)水平；3、取第二代OA軟骨細(xì)胞，分為TCF-4 siRNA干擾組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組，利用siRNA抑制TCF-4表達(dá)后，RealTime-PCR和Western Blot檢測TCF-4和OPN mRNA和蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：⑴OA軟骨細(xì)胞β-catenin和OPN mRNA表達(dá)

3、均高于正常軟骨細(xì)胞(p<0.01)；⑵DKK-1下調(diào)β-catenin表達(dá)后，OA軟骨細(xì)胞OPN mRNA和蛋白表達(dá)均降低(p<0.01)；⑶siRNA干擾TCF-4后，OA軟骨細(xì)胞TCF-4和OPN mRNA與蛋白表達(dá)均降低(p<0.05)。
　　 結(jié)論：①DKK-1可抑制OA軟骨細(xì)胞OPN表達(dá)；②TCF-4 siRNA可抑制OA軟骨細(xì)胞OPN表達(dá)；③Wnt/β-catenin信號(hào)通路通過TCF-4/β-catenin復(fù)合體可