plkl與p21WAFl-CIPl在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌(HCC)是原發(fā)性肝癌中最常見的組織學(xué)類型，也是我國常見惡性腫瘤之一。肝癌的發(fā)生是一個多因素參與、多步驟累積的復(fù)雜過程，包括癌基因的激活和抑癌基因的失活，但其具體分子機(jī)制尚不清楚。因此，研究肝細(xì)胞癌中的基因異常表達(dá)對于闡明肝癌發(fā)生機(jī)制具有重要意義。
　　 plk1是有絲分裂過程中的一種重要激酶，在細(xì)胞周期過程中發(fā)揮多種作用。近年來，plk1與腫瘤的關(guān)系日益受到人們的關(guān)注，目前已在食管癌、胃癌、肝癌、結(jié)直腸癌等多種實(shí)體腫瘤

2、組織中檢測到plk1蛋白的過表達(dá)，且plk1蛋白的過表達(dá)與腫瘤患者的低存活率之間有顯著的相關(guān)性，但是plk1在腫瘤中過表達(dá)的機(jī)制目前還不清楚。一些研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞周期抑制因子p21WAF1/C1F1可以直接作用于plk1基因啟動子區(qū)，抑制plk1基因的表達(dá)，提示腫瘤組織中plk1蛋白的過表達(dá)可能與p21蛋白有關(guān)。本試驗(yàn)采用Western-blot方法檢測10對肝細(xì)胞癌組織中p21和plk1蛋白的表達(dá)，并在HepG2細(xì)胞水平觀察p21過表達(dá)

3、對plk1蛋白和mRNA的改變，探討我國肝細(xì)胞癌組織中p21和plk1蛋白表達(dá)的相關(guān)性，為了解肝細(xì)胞癌的發(fā)生機(jī)制提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 目的：
　　 細(xì)胞周期抑制因子p21WAF1/C1F1(p21)可在轉(zhuǎn)錄水平抑制polo-like kinase1(plk1)基因的表達(dá)，本文詣在探討plk1和p21WAF1/C1F1(p21)蛋白在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及相關(guān)性。
　　 材料與方法：
　　 1.組織標(biāo)本10

4、例肝癌組織及配對癌旁組織標(biāo)本取自于河南省腫瘤醫(yī)院手術(shù)切除標(biāo)本，經(jīng)病理證實(shí)診斷為原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌。癌旁組織取自癌旁5cm以外的非腫瘤肝組織，組織標(biāo)本離體后，立即置于液氮中冷凍備用。所有肝癌患者均為男性，年齡在45-55歲之間，平均年齡為51±11.53歲。上述樣本取材前均經(jīng)患者知情同意。
　　 2.試驗(yàn)方法應(yīng)用Western方法檢測10對肝癌和配對癌旁組織中p21和plk1兩種蛋白的表達(dá)情況。通過將pflex-p21表達(dá)質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)

5、染人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞，進(jìn)一步檢測p21過表達(dá)對plk1mRNA和蛋白表達(dá)的影響。
　　 3.統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS11.5軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，定義p<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 與癌旁組織相比，plk1在10例肝癌組織中的表達(dá)都高于癌旁組織，p21在7例肝癌組織中的表達(dá)高于配對癌旁組織。而在3例肝癌組織中的表達(dá)與配對癌旁組織沒有明顯差異。人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染pflex-p21表