尿嘧啶脫氧核苷和Resovist雙標(biāo)記骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植治療帕金森病大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文尿嘧啶脫氧核苷和Resovist雙標(biāo)記骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植治療帕金森病大鼠的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王蘭申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：羅蔚鋒20090501尿嘧啶脫氧核苷和R e s o v i s t 雙標(biāo)記骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植治療帕金森病大鼠的實(shí)驗(yàn)研究 中文摘要目的： 觀察B r d u 及R e s o v i s t 雙標(biāo)記不同數(shù)量B M S C s 單點(diǎn)移植入P D 大鼠受損紋狀體內(nèi)，通過阿樸嗎啡誘發(fā)旋轉(zhuǎn)試驗(yàn)評(píng)價(jià)

2、最佳移植數(shù)量，通過磁共振活體示蹤、免疫組化檢測B M S C s 在腦內(nèi)的遷移范圍。方法：．體外分離培養(yǎng)S D 大鼠B M S C s ，經(jīng)B r d u 和R e s o v i s t 雙標(biāo)記后移植P D大鼠腦內(nèi)。根據(jù)每注射點(diǎn)細(xì)胞數(shù)量及細(xì)胞是否鐵標(biāo)記，3 6 只P D 大鼠隨機(jī)分成5 組：1 ．0 x 1 0 5 標(biāo)記細(xì)胞組( n = 8 ) 、1 ．5 x 1 0 5 標(biāo)記細(xì)胞組( n = 8 ) 、2 ．0 x 1 0 5 標(biāo)記

3、細(xì)胞組( n = 8 ) 、2 ．5 x 1 0 5標(biāo)記細(xì)胞組( n - 8 ) 和對(duì)照組( n - 4 ) 。移植前1 周和移植后1 、4 、8 周進(jìn)行阿樸嗎啡誘發(fā)旋轉(zhuǎn)試驗(yàn)和M Ⅺ動(dòng)態(tài)示蹤，第9 周處死大鼠，進(jìn)行B r d u 免疫組化確定移植后細(xì)胞遷移范圍。結(jié)果： ( 1 ) 阿樸嗎啡誘發(fā)旋轉(zhuǎn)試驗(yàn)2 ．0 ×1 0 5 移植組阿樸嗎啡每分鐘旋轉(zhuǎn)次數(shù)降低幅度最大，與對(duì)照組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O ．0 5 )

4、 。( 2 ) M R J 檢查：T 1 W I 和T 2 W I序列上可見移植區(qū)明顯的低信號(hào)改變，并隨著時(shí)間的推移發(fā)生廣泛遷移，以第四周遷移最明顯。( 3 ) B r d u 免疫組化：B M S C s 移植后不但向周圍紋狀體組織近距離地遷移，而且沿著胼胝體、室管膜發(fā)生廣泛的遷移。結(jié)論： B r d u 和R e s o v i s t 雙標(biāo)記B M S C s 移植治療P D 大鼠后能夠存活較長時(shí)間( 至少9 周以上) 并發(fā)生廣泛

5、遷移，2 ．0 x 1 0 5 B M S C s 移植組明顯改善大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)，細(xì)胞遷移的結(jié)果最優(yōu)。關(guān)鍵詞 骨髓基質(zhì)細(xì)胞； R e s o v i s t ； 帕金森?。?紋狀體； 尿嘧啶脫氧核苷第二部分 尿嘧啶脫氧核苷和R e s o v i s t 雙標(biāo)記骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植帕金森病大鼠后細(xì)胞分化研究目的： B r d u 及R e s o v i s t 雙標(biāo)記不同數(shù)量B M S C s 移植入P D 大鼠受損紋狀體內(nèi)，通過免疫組

6、化雙染和實(shí)時(shí)熒光定量P C R 檢測移植后細(xì)胞的分化方向。方法：體外分離培養(yǎng)S D 大鼠B M S C s ，經(jīng)B r d u 和R e s o v i s t 雙標(biāo)記后移植P D 大鼠右側(cè)紋狀體內(nèi)，根據(jù)每注射點(diǎn)細(xì)胞數(shù)量以及細(xì)胞是否鐵標(biāo)記，3 6 只P D 大鼠隨機(jī)分成5 組：1 ．0 ×1 0 5 標(biāo)記細(xì)胞組( n _ 8 ) 、1 ．5 x 1 0 5 標(biāo)記細(xì)胞組( n _ 8 ) 、2 ．O ×1 0 ’標(biāo)記細(xì)