CD200在凋亡細胞清除中的作用.pdf

1、背景和目的:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種多器官受累的自身免疫疾病,其發(fā)病機制尚未明確。大量研究表明,細胞凋亡異常及凋亡清除異常在SLE的發(fā)病過程中具有重要意義。CD200是一種跨膜糖蛋白,在多種細胞表面均有表達,主要通過與其受體CD200R結合傳遞免疫調(diào)節(jié)信號。前期研究發(fā)現(xiàn),SLE患者CD200/CD200R的表達水平與正常人存在差異,體外培養(yǎng)SLE患者外周血單個核細胞(PBM

2、C)的凋亡率高于正常對照(HC),且在凋亡過程中CD200在PBMC表面的表達上調(diào),提示SLE患者可能存在CD200/CD200R通路的異常?；诖?本文主要研究了CD200對樹突狀細胞(DC)吞噬凋亡細胞過程的影響。
　　 研究方法:
　　 1.通過流式細胞術分選出CD200+的活細胞、CD200-的活細胞、CD200+的早期凋亡細胞、CD200-的早期凋亡細胞及CD200+的晚期凋亡細胞,并將這幾組細胞與體外誘導的自

3、體樹突狀細胞共孵育。通過熒光顯微鏡及流式細胞術分析樹突狀細胞與各組細胞的接觸率及吞噬率。
　　 2.通過ELISA法測定SLE患者及健康對照凋亡前后培養(yǎng)上清中CD200濃度,并將SLE患者凋亡前后培養(yǎng)上清CD200濃度與SLE活動性指標(SLEDAI、抗dsDNA滴度、C3、ESR、WBC及Lym)進行相關性分析。
　　 3.通過Transwell試驗研究游離型CD200對樹突狀細胞趨化性的影響。
　　 結果:<

4、br>　　 共孵育試驗、Transwell試驗及ELISA結果如下:
　　 1.CD200+細胞與樹突狀細胞的接觸率及吞噬率低于CD200-的細胞。隨著凋亡過程的發(fā)生,細胞與樹突狀細胞的接觸及吞噬率增多。SLE患者活細胞、早期凋亡細胞及晚期凋亡細胞與DC的接觸率有低于HC的趨勢。
　　 2.在正常對照組中,凋亡細胞培養(yǎng)上清中CD200濃度高于活細胞。SLE患者活細胞培養(yǎng)上清內(nèi)CD200濃度與血沉呈正相關,SLE患者凋亡

5、細胞培養(yǎng)上清內(nèi)CD200濃度與C3、外周血WBC數(shù)量呈負相關。
　　 3.CD200無論對未成熟樹突狀細胞還是成熟樹突狀細胞的趨化過程均起著負性調(diào)節(jié)的作用。
　　 結論:本文通過研究CD200對吞噬過程的影響,得出結論:在凋亡過程中,不僅細胞表面CD200的表達上調(diào),其培養(yǎng)上清中CD200濃度亦有所升高。在凋亡吞噬過程中,游離型CD200作為“don't find me”信號,負性趨化樹突狀細胞,細胞膜表面的CD200作