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文檔簡(jiǎn)介
1、本課題根據(jù)已發(fā)表的弓形蟲(chóng)P30和Rop2的基因序列,自行設(shè)計(jì)合成兩對(duì)引物,在引物的5'末端適當(dāng)?shù)奈恢梅謩e加上合適的限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn),采用分子生物學(xué)定向克隆的方法,在保證其開(kāi)放讀碼框均正確的前提下,使Rop2基因可以定向克隆在P30基因的后面,成功構(gòu)建了含復(fù)合基因的克隆質(zhì)粒(pUC18-P30-Rop2)及表達(dá)質(zhì)粒(pTriEx-4-P30-ROP2),并在大腸桿菌中成功表達(dá)了P30-Rop2復(fù)合基因的融合蛋白,表達(dá)產(chǎn)物行SDS-PA
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