維甲酸聯(lián)合Purmorphamine誘導(dǎo)皮膚源性前體細(xì)胞向運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分化的研究.pdf

1、目的:
　　探索利用維甲酸（retinoic acid，RA）和Purmorphamine（PM）誘導(dǎo)皮膚源性前體細(xì)胞（skin-derived precursors，SKPs）向運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元分化，為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元移植治療失神經(jīng)肌萎縮提供依據(jù)。
　　方法:
　　1.從新生大鼠皮膚分離SKPs，進(jìn)行培養(yǎng)、增殖，采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)SKPs標(biāo)記物巢蛋白（Nestin）和纖維連接蛋白（Fibronectin）的表達(dá)。
　　

2、2.使用RA、PM作為誘導(dǎo)因子，誘導(dǎo)第3代SKPs細(xì)胞球向MNs分化。
　　3.添加GDNF、BDNF等生長(zhǎng)因子促使軸突延長(zhǎng)，形成成熟的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元。
　　4.通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè) MNs標(biāo)記物 HB9和膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（choline acetyltransferase，ChAT）的表達(dá)，鑒定分化細(xì)胞是否為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元，并計(jì)算ChAT、HB9陽(yáng)性率。
　　結(jié)果:
　　1.分離培養(yǎng)的SKPs懸浮生長(zhǎng)，細(xì)胞透亮，折光性