火雞組織滴蟲傳代致弱株的選育及其免疫保護(hù)效果研究.pdf

1、禽組織滴蟲病(Histomoniasis)又稱為傳染性盲腸肝炎或“黑頭病”，是由火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis,H meleagridis)引起的雞形目禽類的一種原生寄生蟲病，以肝臟壞死、盲腸腫大和排硫磺樣糞便為主要特征，對(duì)火雞的致死率很高，會(huì)引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前，在歐美等火雞主要飼養(yǎng)地區(qū)，主要應(yīng)用化學(xué)藥物進(jìn)行預(yù)防和治療，但是由于大多數(shù)此類藥物具有潛在的致癌性而被禁用，導(dǎo)致該病近些年發(fā)生大規(guī)模傳播和流行，

2、給火雞養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的危害。近年來，隨著國內(nèi)規(guī)?；鷳B(tài)圈養(yǎng)和放養(yǎng)等健康養(yǎng)殖技術(shù)的示范和推廣，組織滴蟲病在我國雞群中的流行和發(fā)生也越來越嚴(yán)重。本研究在前期獲得火雞組織滴蟲分離株的基礎(chǔ)上，通過體外連續(xù)傳代選育出致弱蟲株，并初步探究了其免疫保護(hù)效果。同時(shí)，研究了青蒿素對(duì)火雞組織滴蟲的體內(nèi)外抑制效果，旨在為研制抵抗禽組織滴蟲病的新藥和疫苗提供一定的參考。
　　1.火雞組織滴蟲傳代致弱株的選育及其致弱效果
　　將本實(shí)驗(yàn)室分離到的兩株

3、火雞組織滴蟲JSYZ-A和JSYZ-B體外連續(xù)傳代培養(yǎng)，選育弱毒株，當(dāng)傳至一定代次時(shí)，將其和它們復(fù)蘇的原先凍存株經(jīng)泄殖腔人工感染18日齡白羽肉雞，感染后飼養(yǎng)觀察15天，然后全部撲殺，分別對(duì)各組雞的臨床表現(xiàn)、死亡率、增重情況、肝臟和盲腸病變計(jì)分情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較各蟲株致病力的差異。結(jié)果表明:火雞組織滴蟲體外連續(xù)傳代培養(yǎng)可降低其致病力。本研究獲得火雞組織滴蟲傳代致弱株，為下一步開展致弱株的免疫保護(hù)效果研究奠定基礎(chǔ)。
　　2.火雞組

4、織滴蟲傳代致弱株的免疫保護(hù)效果
　　將火雞組織滴蟲傳代致弱株JSYZ-B332以103、104、105個(gè)/羽于15日齡經(jīng)泄殖腔各接種10只黃羽肉雞，接種21天后，以強(qiáng)毒株JSYZ-A18105個(gè)/羽經(jīng)泄殖腔攻蟲，15天后全部撲殺，分別對(duì)各組雞的臨床表現(xiàn)、死亡率、增重情況、肝臟和盲腸病變計(jì)分情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果表明:各免疫組的臨床表現(xiàn)、死亡率都比未免疫攻蟲對(duì)照組好;增重比未免疫攻蟲對(duì)照組有所改善，且差異顯著;肝臟和盲腸病變均比未免

5、疫攻蟲對(duì)照組輕，且差異顯著。各劑量免疫組中，以高劑量組的免疫保護(hù)效果最佳。本研究表明火雞組織滴蟲傳代致弱株JSYZ-B332具有一定的免疫保護(hù)效果，可以進(jìn)一步用于疫苗的研制。
　　3.青蒿素對(duì)火雞組織滴蟲的體內(nèi)外抑制效果
　　在傳代培養(yǎng)的蟲體加入不同濃度的青蒿素(500ppm、1000ppm、1500ppm)和對(duì)照藥物替硝唑，定期蟲體計(jì)數(shù)，評(píng)價(jià)藥物的抑制效果。結(jié)果表明:各濃度的青蒿素均能抑制火雞組織滴蟲的體外增殖，其中以15

6、00 ppm的效果最佳。體內(nèi)抑制試驗(yàn)分為感染給藥組、感染不給藥組和不感染不給藥組，每組10只雞，15日齡經(jīng)泄殖腔人工感染JSYZ-A18株，感染后給藥組每天添加150mg/kg飼料的青蒿素，15天后全部撲殺，分別對(duì)各組雞的發(fā)病率、死亡率、增重情況、肝臟和盲腸病變計(jì)分情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果表明:青蒿素保護(hù)組的臨床表現(xiàn)、死亡率都比攻蟲對(duì)照組好;增重介于攻蟲對(duì)照組和健康對(duì)照組之間;肝臟和盲腸雖有病變，但程度比攻蟲對(duì)照組輕。本研究表明青蒿素在體