高分化星形細(xì)胞瘤蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、研究背景：星形細(xì)胞瘤是最常見的神經(jīng)上皮性腫瘤，占顱內(nèi)腫瘤的13％～26％，占膠質(zhì)瘤21.2％～51.6％。可發(fā)生于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的任何部位，以幕上多見約占75％。腫瘤呈浸潤性生長，術(shù)中多難以完全切除，術(shù)后復(fù)發(fā)率、致殘率較高，預(yù)后差。 近年出現(xiàn)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以比較兩個或多個樣品之間蛋白質(zhì)整體表達(dá)水平，應(yīng)用于腫瘤生物學(xué)標(biāo)志物的篩選和鑒定、腫瘤早期診斷和分類、腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制等方面的研究，同時也進(jìn)一步提供篩選腫瘤治療的有效靶點(diǎn)蛋白，

2、成為腫瘤研究的最前沿領(lǐng)域和熱點(diǎn)之一，也是生命科學(xué)進(jìn)入后基因組時代的標(biāo)志之一。 本研究采用蛋白質(zhì)組技術(shù)，研究高分化星形細(xì)胞瘤及與正常腦組織的差異蛋白質(zhì)表達(dá)以深入了解星形細(xì)胞瘤的起源、生長的分子機(jī)制，為尋求新的診斷及治療方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 目的：研究高分化星形細(xì)胞瘤差異蛋白質(zhì)表達(dá)，篩選和鑒定星形細(xì)胞瘤生物學(xué)分子標(biāo)志物及發(fā)現(xiàn)治療靶點(diǎn)蛋白，為星形細(xì)胞瘤的治療及預(yù)后的判斷提供依據(jù)。 方法：標(biāo)本取白湘雅二醫(yī)院和湘雅醫(yī)院經(jīng)病理

3、證實(shí)的正常腦組織及高分化的星形細(xì)胞瘤(KemohanI、II級)。腦組織經(jīng)蛋白提取、第一向等電聚焦電泳、第二向垂直SDS-PAGE電泳后，用銀染和考馬斯亮蘭染色。投射掃描雙向電泳凝膠板，所得的圖譜以PDQUEST2D 膠分析系統(tǒng)軟件進(jìn)行圖像分析。將感興趣的蛋白質(zhì)點(diǎn)從考染的凝膠上切下，行膠內(nèi)蛋白質(zhì)酶解。以MALDI-TFO質(zhì)譜或MALDI-TOF/TOF串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合數(shù)據(jù)庫檢索對蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定。． 結(jié)果：通過雙向電泳得到了正常

4、腦組織和高分化星形細(xì)胞瘤標(biāo)本的雙向凝膠電泳圖譜，并以生物質(zhì)譜技術(shù)鑒定了25個差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，包括中間代謝酶類、細(xì)胞骨架蛋白、抗氧化蛋白、神經(jīng)元特異蛋白、熱休克蛋白類等。與正常腦組織相比，高分化星形細(xì)胞瘤蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜上有9個蛋白質(zhì)點(diǎn)下調(diào)，16個蛋白質(zhì)點(diǎn)上調(diào)。其中烯醇化酶—2、神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白、醛縮酶A、二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白—2、肌酸激酶、髓磷脂堿性蛋白等蛋白質(zhì)下調(diào)，而熱休克蛋白及其伴侶蛋白、蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶、a—羥基異丁酸脫氫酶、A

5、TP合酶、甲狀腺素結(jié)合蛋白、錳超氧化物歧化酶等蛋白質(zhì)上調(diào)。 結(jié)論：以蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定了正常腦組織和高分化星形細(xì)胞瘤的差異蛋白質(zhì)，部分蛋白質(zhì)有助于深入研究星形細(xì)胞瘤的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制并對進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)腫瘤標(biāo)記物及治療靶點(diǎn)有重要的參考價值。 1．初步建立了人高分化星形細(xì)胞瘤和正常腦組織的雙向凝膠電泳圖譜。 2．本研究以質(zhì)譜技術(shù)鑒定了高分化星形細(xì)胞瘤和正常腦組織雙向電泳凝膠上的25個差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，其中在高分化星形細(xì)胞