頸動脈內(nèi)注射內(nèi)皮素-1對間歇性低氧大鼠腎交感神經(jīng)活動的影響及其機(jī)制.pdf

1、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(Obstructive sleep apnea syndrome，OSAS)是一種常見的睡眠相關(guān)呼吸系統(tǒng)疾病，臨床上以打鼾，夜間睡眠呼吸暫停為特征。OSAS患者伴有交感神經(jīng)活動(SNA)增強(qiáng)和平均動脈壓(MAP)升高，以及交感神經(jīng)對低氧刺激反應(yīng)增強(qiáng)。用慢性間歇性低氧(Chronic intermittent hypoxia，CIH)動物模型模擬OSAS中的間歇性低氧血癥，研究CIH引起SNA和MAP改變的短期或

2、長期調(diào)節(jié)機(jī)制。OSAS患者和實(shí)驗(yàn)動物出現(xiàn)的高血壓可能是源于頸動脈竇神經(jīng)的過度興奮，后者引起化學(xué)反射調(diào)節(jié)的SNA增加。間歇性低氧誘導(dǎo)高血壓的發(fā)病機(jī)制還沒有完全明確，然而眾多研究證實(shí)內(nèi)皮素-1(ET-1)是頸動脈體化學(xué)感受器興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，可能ET-1通過激活化學(xué)感受反射，引起SNA改變。本研究旨在利用CIH模型，通過頸動脈注射ET-1直接刺激頸動脈體化學(xué)感受器，觀察MAP和腎交感神經(jīng)活動(RSNA)的改變，探討ET-1在CIH所致高血壓中

3、的作用。
　　目的:通過觀察ET-1對CIH大鼠MAP和RSNA的影響，探討ET-1在CIH所致大鼠高血壓中的作用及部分作用機(jī)制。
　　方法:SPF級雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠(n=120)隨機(jī)分成2組:常氧對照組(Normoxia)和CIH組各60只。CIH組大鼠置于程序低氧艙內(nèi)，給予每天8小時的低氧，一共21天。程序設(shè)計每一低氧復(fù)氧循環(huán)周期時間為3分鐘，前1.5分鐘充入氮?dú)?N2)使氧濃度下降至9％，后

4、1.5分鐘充入氧氣(O2)使氧濃度恢復(fù)至到21％;常氧對照組置于同樣的艙內(nèi)充空氣使艙內(nèi)氧濃度維持在21％。造模后用大鼠尾動脈血壓測量系統(tǒng)監(jiān)測大鼠尾動脈壓。21天CIH后分別取各組大鼠進(jìn)行整體動物實(shí)驗(yàn)。兩組大鼠烏拉坦麻醉后股動脈插管監(jiān)測血壓，股靜脈插管用于靜脈補(bǔ)液和給藥。同時氣管插管和頸動脈插管。實(shí)驗(yàn)設(shè)計分為:(1)去壓力反射常氧對照大鼠采取頸動脈注射的方法，觀察不同劑量(0.1，0.3，1，3，10nmol/kg)ET-1引起的RSNA

5、的改變，繪制劑量曲線，確定ET-1注射劑量。(2)去壓力反射和化學(xué)反射常氧對照大鼠注射ET-1記錄MAP和RSNA的改變。(3)去壓力反射常氧對照和CIH大鼠頸動脈注射ET-1以及ET-1受體和信號通路阻斷劑，比較常氧對照大鼠和CIH大鼠MAP和RSNA的改變。
　　結(jié)果:
　　1 CIH對大鼠尾動脈壓的影響
　　與常氧對照大鼠(110.3±3.81mmHg)比較，CIH(145.7±5.74mmHg)顯著增加大鼠尾動

6、脈壓(P＜0.01)。
　　2 CIH對大鼠麻醉狀態(tài)靜息MAP和RSNA的影響
　　麻醉后，與常氧對照大鼠(94.18±5.58mmHg)比較，CIH(110.12±4.93mmHg)顯著增加大鼠靜息MAP(P＜0.01)。與常氧對照大鼠(37.03±3.88mv.s)比較，CIH（52.24±2.98mv.s）顯著增加大鼠靜息RSNA(P＜0.01)。
　　3不同濃度ET-1對去壓力反射常氧對照大鼠RSNA的影響

7、r>　　注射不同劑量ET-1，引起劑量依賴性RSNA增加。1nmol/kg濃度的ET-1即可引起最適的RSNA改變。
　　4 ET-1對去壓力和化學(xué)反射常氧對照大鼠RSNA的影響
　　去壓力和化學(xué)反射神經(jīng)后，給予ET-1未見RSNA有顯著改變。
　　5 ET-1對去壓力反射CIH大鼠MAP和RSNA的影響
　　與常氧對照大鼠（10.92±1.84％）比較，給予ET-1后，CIH大鼠(15.05±2.04％)MAP

8、顯著升高(P＜0.01);與常氧對照大鼠（7.34±1.77％）比較，給予ET-1后，CIH大鼠(11.78±1.55％) RSNA顯著升高(P＜0.01)。
　　6 ET-1受體拮抗劑對去壓力反射CIH大鼠MAP和RSNA的影響
　　注射ETA受體拮抗劑BQ123(0.3mg/kg)處理15后再次注射ET-1(1nmol/kg)，與常氧對照大鼠（85.47±10.9％）比較，給予BQ123后，CIH（97.3±12.3％）

9、可顯著抑制ET-1誘導(dǎo)的MAP升高(P＜0.01);與常氧對照大鼠（175.46±13.6％）比較，給予BQ123后，CIH(224.61±15.9％)可顯著抑制ET-1誘導(dǎo)的RSNA升高(P＜0.05)。注射ETB受體拮抗劑BQ788(0.3mg/kg)處理15后再次注射ET-1(1nmol/kg)，與常氧對照大鼠(25.24±2.3％)比較，給予BQ788后，CIH（65.10±5.6％）可顯著增強(qiáng)ET-1誘導(dǎo)的MAP升高(P＜0.

10、01);與常氧對照大鼠(31.17±5.9％)比較，給予BQ788后，CIH（172.63±11.6％）可顯著增強(qiáng)ET-1誘導(dǎo)的RSNA升高(P＜0.01)。
　　7 P38MAPK和PKC信號通路拮抗劑對去壓力反射CIH大鼠MAP和RSNA的影響
　　注射P38MAPK信號通路拮抗劑SB203580(0.3mg/kg)處理15后再次注射ET-1(1nmol/kg)，與常氧對照大鼠（40.65±5.7％）比較，給予SB203

11、580后，CIH（41.1±6.3％）可顯著抑制ET-1誘導(dǎo)的MAP升高(P＜0.01);與常氧對照大鼠（34.18±3.6％）比較，給予SB203580后，CIH（33.27±3.9％）可顯著抑制ET-1誘導(dǎo)的RSNA升高(P＜0.01)。注射PKC信號通路拮抗劑Chelerythine(0.3mg/kg)處理15后再次注射ET-1(1nmol/kg)，與常氧對照大鼠（61.90±6.3％）比較，給予Chelerythine后，CIH

12、（62±7.2％）可顯著抑制ET-1誘導(dǎo)的MAP升高(P＜0.01);與常氧對照大鼠(50.34±5.7％)比較，給予Chelerythine后，CIH(51.03±6.2％)可顯著抑制ET-1誘導(dǎo)的RSNA升高（P＜0.01）。
　　結(jié)論:CIH顯著誘發(fā)MAP和RSNA升高;ET-1可使去壓力反射神經(jīng)大鼠MAP和RSNA升高，與常氧對照大鼠比較，CIH大鼠升高更為顯著;ETA受體拮抗劑BQ123、P38MAPK信號通路拮抗劑SB