雷帕霉素對肺癌LK2細胞microRNA表達的影響.pdf

1、目的：
　　研究藥物雷帕霉素作用于非小細胞肺癌LK2細胞后microRNA表達的變化。
　　方法：
　　于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)非小細胞肺癌LK2細胞，加入終濃度為1umol/L的雷帕霉素溶液，采用加入等量的RPMI-1640培養(yǎng)基作為陰性對照，在培養(yǎng)溫箱中過夜培養(yǎng)48小時之后，在培養(yǎng)瓶內(nèi)加入1ml試劑Trizol，并使其充分接觸細胞，從肺癌LK2細胞中提取RNA后，首先制備cDNA文庫，將cDNA文庫上機測序。采用了Illum

2、ina HiSeqTM 2500 microRNA測序方法進行microRNA測序，檢測雷帕霉素作用于非小細胞肺癌LK2細胞后其中的microRNA的表達變化，并將其中表達有顯著差異改變的microRNA進行靶基因預測，將與細胞增殖和凋亡相關(guān)的基因篩選出來進行靶基因預測。
　　結(jié)果：
　　與對照組相比，Illumina HiSeqTM 2500 miRNA測序顯示，雷帕霉素作用于非小細胞肺癌LK2細胞后microRNA的表達

3、有變化。實驗中我們能夠發(fā)現(xiàn)有9個microRNAs表達具有高顯著差異，其中miR-320c，miR-1283，miR-29b-3p，miR-181c-5p，miR-24-3p，miR-26a-5p的表達顯著增強。而miR-320b，miR-19b-3p，miR-181c-6p表達明顯降低。通過預測了上述microRNA的與細胞增殖及凋亡相關(guān)靶基因，得到例如有PAX3，HMGB2等靶基因。
　　結(jié)論：
　　雷帕霉素作用于非小細