藥物誘導(dǎo)大鼠隱睪模型比較及T3干預(yù)Flutamide誘導(dǎo)隱睪NCAM表達(dá)研究.pdf

1、目的:
　　 比較鄰苯二酸二丁酯(DBP)、己烯雌酚(DES)、氟他胺(Flu)宮內(nèi)誘導(dǎo)SD鼠隱睪模型的組織病理變化,選擇與臨床隱睪病理改變接近的模型。觀(guān)察T3調(diào)控SD鼠隱睪生殖母細(xì)胞(Gonocyte,Go)發(fā)育及NCAM表達(dá)。
　　 方法:
　　 ①SD孕鼠,于受孕(gestational day GD)12-21d給予DES、Flu皮下注射,DBP灌胃,建立大鼠隱睪模型；收集50個(gè)臨床隱睪活檢組織。

2、　　 ②免疫組化定性、定位檢測(cè)睪丸NCAM的表達(dá)。
　　 ③T315μg·kg-1·d-1皮下注射Flu誘導(dǎo)PD1仔鼠,PD20隱睪鼠,觀(guān)察干預(yù)后隱睪發(fā)生率、組織學(xué)改變,以及NCAM在的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 ①Flu誘導(dǎo)大鼠隱睪發(fā)生率為42.2％,睪丸位于腹股溝,尿道下裂發(fā)生率93.3％。睪丸體積、臟器系數(shù)明顯小于正常對(duì)照組(P<0.01)。Flu隱睪管腔化延遲；PD20、PD80隱睪管腔中央仍可見(jiàn)未遷移

3、的Go,PD80曲細(xì)精管中無(wú)精子生成；平均曲細(xì)精管直徑(MSTD)和面積(MSTA)與正常相比有顯著性差異(P＜0.01)。
　　 ②DBP誘導(dǎo)大鼠隱睪發(fā)生率為為42.5％,隱睪位于腹腔,尿道下國(guó)家自然科學(xué)基金:30772274重慶市自然科學(xué)基金:CSTC,2007BB5285裂發(fā)生率25.0％。睪丸體積、臟器系數(shù)明顯小于正常(P＜0.01),曲細(xì)精管中無(wú)精子生成,生精細(xì)胞稀少,部分管腔僅有支持細(xì)胞。
　　 ③DES高劑

4、量可致SD孕鼠流產(chǎn)或死亡,低劑量1.5μg·kg-1·d-1不能誘導(dǎo)出隱睪模型。仔鼠發(fā)育與正常接近,成年后均具有生殖能力。睪丸體積、臟器系數(shù)、MSTD、MSTA與正常組無(wú)顯著性差異(P＞0.05),管腔中央可見(jiàn)大量的精子生成。
　　 ④50個(gè)臨床隱睪中,NCAM表達(dá)分布模式有4種:(1)曲細(xì)精管內(nèi)陰性表達(dá)、間質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)42％,為生理發(fā)育規(guī)律表達(dá)；(2)曲細(xì)精管內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)、間質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)26％；(3)曲細(xì)精管內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)、間質(zhì)

5、細(xì)胞陰性表達(dá)4％；(4)曲細(xì)精管內(nèi)陰性表達(dá)、間質(zhì)細(xì)胞陰性表達(dá)28％。
　　 ⑤DES、DBP大鼠曲細(xì)精管NCAM表達(dá)與正常組一致,PD1管腔內(nèi)Go均有陽(yáng)性表達(dá),PD10管腔內(nèi)Go遷移至基底膜,NCAM表達(dá)明顯減弱至消失。PD20、PD80隱睪及下降睪丸曲細(xì)精管內(nèi)NCAM陰性表達(dá)。Flu誘導(dǎo)PD10、PD20、PD80隱睪管腔NCAM陽(yáng)性表達(dá)。
　　 ⑥T315μg·kg-1·d-1干預(yù):Flu誘導(dǎo)PD1仔鼠,成年后隱睪發(fā)

6、生率為25％(4/16),較未干預(yù)組的隱睪發(fā)生率42.9％(12/28)降低,并可促進(jìn)曲細(xì)精管管腔化,隱睪曲細(xì)精管內(nèi)NCAM陰性表達(dá)。
　　 ⑦Flu誘導(dǎo)的PD13仔鼠睪丸NCAM的mRNA表達(dá)均明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.05),T3干預(yù)后,NCAM的mRNA表達(dá)明顯低于非T3干預(yù)組(P<0.05),并與正常對(duì)照組無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 ①孕期宮內(nèi)誘導(dǎo)隱睪模型中,Flu誘導(dǎo)的隱睪組織中