外周與中樞抗原遞呈細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞對(duì)IL-27表達(dá)抑制.pdf

1、目的:探討在炎癥因子與凋亡細(xì)胞刺激下對(duì)機(jī)體抗原遞呈細(xì)胞白細(xì)胞介素27（Interleukin-27，IL-27）表達(dá)的調(diào)控。以及機(jī)體抗原遞呈細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞后對(duì)白細(xì)胞介素27表達(dá)的調(diào)控。
　　方法:采用熒光素酶報(bào)告基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)染鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7(RAW細(xì)胞)細(xì)胞，用脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)、干擾素γ（IFN-γ）和X射線誘導(dǎo)凋亡細(xì)胞對(duì)細(xì)胞刺激，比較各組細(xì)胞中p28亞基啟動(dòng)子熒光素酶活性;用同

2、樣條件對(duì)RAW細(xì)胞、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞和骨髓源樹突狀細(xì)胞刺激，采用實(shí)時(shí)定量PCR法，檢測(cè)不同刺激組細(xì)胞中IL-27 p28亞基基因mRNA的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平。使用Western Blot法檢測(cè)不同刺激組細(xì)胞內(nèi)IL-27總蛋白表達(dá)水平。用ELISAs探測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞在不同條件刺激下培養(yǎng)液內(nèi)IL-27蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果:LPS刺激和LPS與IFNγ共刺激的小膠質(zhì)細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞IL-27 p28基因mRNA表達(dá)與空白對(duì)照