辛伐他汀對大鼠腎缺血再灌注損傷中Wnt-JNK影響的研究.pdf

1、目的：
　　 探討大鼠腎缺血再灌注損傷(IRI)后信號分子Wnt4、c-jun氨基末端激酶1(c-junN-terminalKinase1JNK1)的表達(dá)以及辛伐他汀(simvastatinSIM)對Wnt/JNK信號通路的影響。
　　 方法：
　　 雄性Wistar大鼠36只隨機(jī)分為假手術(shù)組、手術(shù)組和SIM干預(yù)組，每組12只，按腎缺血再灌注時(shí)間不同，每組再分為6h、48h兩個(gè)時(shí)相組，每組6只大鼠。造模方法：手術(shù)

2、組：無創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉大鼠雙側(cè)腎動(dòng)脈，夾閉時(shí)間為45min，后分別恢復(fù)灌注6h、48h，制成腎IRI模型；假手術(shù)組：開腹后，游離雙側(cè)腎動(dòng)脈但不夾閉，再關(guān)閉腹腔。SIM干預(yù)組：術(shù)前一周灌胃辛伐他汀20mg.kg-1.d-1，其余處理與手術(shù)組相同。腎IRI后6h、48h，檢測血清Scr濃度，行腎組織病理學(xué)觀察，免疫組織化學(xué)法測定腎組織Wnt4、JNK1及其信號通路下游炎癥因子腫瘤壞死因子-α(tumornecrosisfactor-alphaT

3、NFα)的表達(dá)，并采用熒光定量PCR法測定腎組織Wnt4mRNA、JNK1mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1．Scr測定：與假手術(shù)組比，手術(shù)組Scr值6h明顯升高,48h持續(xù)高水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，且以IRI后48h的Scr值較高(P＜0.01)；與手術(shù)組比，SIM干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)Scr值較手術(shù)組明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 2.腎組織病理學(xué)觀察(HE)：假手術(shù)組：腎小

4、球與腎小管大小形態(tài)正常；手術(shù)組：腎小管上皮細(xì)胞呈明顯腫脹、壞死、管腔擴(kuò)張、排列紊亂，腎間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤，以IRI后6h為著；SIM干預(yù)組：腎小球、腎小管損傷程度較手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)明顯減輕。
　　 3.Wnt4、JNK1、TNFα檢測：與假手術(shù)組比，手術(shù)組腎小管上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)Wnt4、JNK1、TNFα蛋白表達(dá)增強(qiáng)，Wnt4mRNA、JNK1mRNA表達(dá)水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，且在6h時(shí)表達(dá)明顯(P＜0.01)

5、；與手術(shù)組比，SIM干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)Wnt4、JNK1、TNFα蛋白表達(dá)水平減弱，Wnt4mRNA、JNK1mRNA表達(dá)水平均有所下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。干預(yù)效應(yīng)與時(shí)間效應(yīng)交互作用顯著(P＜0.01)。
　　 4.相關(guān)性分析：JNK1光密度比率與Wnt4光密度比率成正相關(guān)(rs=0.93)，JNK1光密度比率與TNFα光密度比率成正相關(guān)（rs=0.92），Wnt4mRNACT值與JNK1mRNACT值也成正相關(guān)（r

6、s=0.68），另外Wnt4光密度比率、JNK1光密度比率、TNFα光密度比率、JNK1mRNACT值、Wnt4mRNACT值均與Scr成正相關(guān)（rs分別為rs=0.76，rs=0.72，rs=0.72，rs=0.70，rs=0.35）。
　　 結(jié)論:
　　 1.IRI后，大鼠腎組織中Wnt4、JNK1、TNFα蛋白以及Wnt4mRNA、JNK1mRNA表達(dá)明顯上調(diào)，且JNK1蛋白與Wnt4、TNFα蛋白均成正相關(guān)，Wn

7、t4mRNACT值與JNK1mRNACT值成正相關(guān)，以上各指標(biāo)均與Scr成正相關(guān)，提示缺血再灌注可能通過調(diào)節(jié)Wnt4/JNK1通路，造成組織損傷，進(jìn)一步激發(fā)其下游的炎癥因子TNFα，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。
　　 2.辛伐他汀預(yù)處理后，各組大鼠腎組織中Wnt4、JNK1、TNFα蛋白以及Wnt4mRNA、JNK1mRNA表達(dá)下調(diào)，提示辛伐他汀預(yù)處理能明顯減輕缺血再灌注后大鼠腎功能和腎組織結(jié)構(gòu)的損害，對腎缺血再灌注損傷起到顯著的保護(hù)作