美國白蛾核型多角體病毒的穩(wěn)定性研究.pdf

1、本文采用生物測定的方法，研究了溫度、紫外輻射、pH值、日光照射和保存時間對美國白蛾核型多角體病毒(HcNPV)穩(wěn)定性的影響，HcNPV的穩(wěn)定性主要由感染美國白蛾幼蟲的死亡率及致死中時間的變化來評價，主要結(jié)果如下:
　　1、水浴55℃處理美國白蛾核型多角體病毒水劑，滅活時間—死亡率的回歸方程為:y=83.44-0.31x(p＜0.01)，相應(yīng)的，處理的HcNPV感染美國白蛾的LT50也由12.18 d到15.81 d逐漸增長。處理9

2、0 min，HcNPV活性仍有50％以上。
　　HcNPV干粉比HcNPV水劑對溫度的耐受性更強，處理時間同為15 min，水浴處理的病毒水劑的溫度—死亡率回歸方程為:=104.16-0.93x(p＜0.01)，100℃處理后，病毒水劑的致病率僅為17.41％;烘箱處理的病毒干粉的溫度—死亡率回歸方程為:y=101.31-0.46 x(p＜0.01)，120℃處理后，干粉病毒的致病率仍有53.91％。
　　水浴55℃處理美國

3、白蛾核型多角體病毒水劑150 min和水浴80℃處理美國白蛾核型多角體病毒水劑15 min，HcNPV活性仍然保有30％左右，因此，說明HcNPV水劑對一定時間的亞高溫(40℃～60℃)和短時的高溫(80℃以上)有一定的耐受性。
　　2、30W(波長為200 nm～300 nm，最強處波長為253.7 nm)的紫外燈在強度為213μw/cm2處對美國白蛾核型多角體病毒進行紫外線輻射，輻射時間—死亡率的回歸方程為:y=102.46-

4、0.41x(p＜0.01);在不同強度下，輻射30 min，輻射強度-死亡率的回歸方程為:y=110.70-0.06x(p＜0.01)。強度為213μw/cm2的紫外線輻射120 min和強度為765μw/cm2的紫外線輻射30 min，美國白蛾核型多角體病毒感染美國白蛾幼蟲的死亡率仍然在55％以上，說明美國白蛾核型多角體病毒可以耐受較長時間的低強度紫外線和短時的高強度紫外線輻射。
　　無論是紫外輻射時間不同還是紫外強度不同，紫外

5、輻射對美國白蛾核型多角體病毒感染宿主整個過程的前期(3～6 d)沒有顯著影響，對感染后期(7～12 d)的影響較為顯著，尤其是感染9d后的影響尤為顯著。
　　3、美國白蛾核型多角體病毒在pH7的環(huán)境中，活性最強。升高或降低pH值，美國白蛾核型多角體病毒感染的美國白蛾幼蟲的死亡率都會下降，但在pH6和pH8～12的條件下，其感病幼蟲的死亡率沒有顯著性差異。隨著pH的升高，HcNPV感染美國白蛾幼蟲的LT50逐漸縮短。由于pH10和p

6、H12的溶液體系非緩沖體系，溶液體系最終的pH都降低到7～8之間，而其他各溶液體系的pH變化不大。
　　4、美國白蛾核型多角體病毒在野外環(huán)境條件中具有一定的存活能力，自然暴露10d，其活性仍然有63.35％。晴朗高溫的天氣狀況不利于HcNPV維持其穩(wěn)定性。整體上，晴朗高溫天氣時的相對滅活率高于陰雨天氣的，但在第一天的晴朗高溫天氣狀況下暴露，HcNPV的相對滅活率最低。
　　5、不同方法儲存的美國白蛾核型多角體病毒，其穩(wěn)定性不

7、同。保存7年的美國白蛾核型多角體病毒，冷凍儲存的比冷藏的活性高;冷凍保存7年的、冷凍保存3年的和冷藏保存1年的美國白蛾核型多角體病毒活性與當(dāng)年新復(fù)制提存的沒有顯著差異，因此，對于長期保存，冷凍保存相對于冷藏保存是能保持HcNPV活性的儲存方法。
　　保存5年的美國白蛾核型多角體病毒與其他各保存年限的HcNPV相比，LT50顯著增長，對宿主的致病率顯著降低，是由于保存過程中，曾提純過部分該病毒，在此過程中出現(xiàn)了反復(fù)凍融，因此，反復(fù)凍