西農(nóng)薩能奶山羊β-酪蛋白基因5′側(cè)序列克隆和分析及乳腺特異性表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf

1、　　乳腺生物反應(yīng)器(MGB)是一種高效率蛋白質(zhì)合成器官，它可以利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺組織生產(chǎn)基因工程藥用蛋白。采用基因工程技術(shù)在動(dòng)物乳腺生產(chǎn)有藥用價(jià)值的蛋白質(zhì)和多肽，具有產(chǎn)量高、成本低和產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)。目前常用的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物有豬、羊、牛，它們的泌乳量大，活性蛋白的產(chǎn)量高，且乳液容易收集。因此，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器就像一座生產(chǎn)活性蛋白的藥物工廠，能夠源源不斷地生產(chǎn)出人類所需的藥用蛋白?！　∠嚓P(guān)研究結(jié)果如下：　　1.克隆了西農(nóng)薩能奶山

2、羊β-酪蛋白基因5’側(cè)序列，共6,465bp的片段，所測(cè)序列已登錄GenBank，GenBankAccessionNo.AY834229。用啟動(dòng)子和增強(qiáng)子捕獲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，證明所克隆的6,465bp的序列具有啟動(dòng)子和增強(qiáng)子元件。　　2.利用該5’側(cè)序列構(gòu)建了乳腺特異性表達(dá)載體pcDNA3.1-65，并將hBMP2的cDNA片斷克隆入該載體，初步用西農(nóng)薩能奶山羊乳腺上皮細(xì)胞檢測(cè)，證明該載體能受促乳素誘導(dǎo)而表達(dá)hBMP2，為進(jìn)一步建立轉(zhuǎn)基因動(dòng)