慢病毒介導的GTPBP4基因沉默對人肝癌細胞侵襲遷移能力的影響.pdf

1、分類號：密級：UDC：學號：416522613555南昌大學專業(yè)學位碩士研究生學位論文慢病毒介導的慢病毒介導的GTPBP4基因沉默對人肝癌細胞侵襲基因沉默對人肝癌細胞侵襲遷移能力的影響遷移能力的影響TheeffectsofsilenceofGTPBP4bylentivirusoninvasionmetastasisofhumanhepatocarcinomacell鄭燕培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學醫(yī)學院指導教師姓名、職稱：張吉翔教授申請

2、學位的學科門類：醫(yī)學學科專業(yè)名稱：消化內(nèi)科論文答辯日期：2016年5月答辯委員會主席：評閱人：2016年5月摘要II摘要目的目的：本實驗組前期基因芯片篩查提示，GTPBP4在肝癌組織中呈現(xiàn)高表達。本研究旨在運用慢病毒載體介導的RNAi技術(shù)，使GTPBP4基因達到沉默的效果，進一步觀察GTPBP4對肝癌細胞侵襲及遷移能力造成的影響。方法方法：1、選取人肝癌SMMC7721細胞和MHCC97H細胞，利用qRTPCR和WesternBlot法

3、在mRNA水平和蛋白水平篩選出最有效GTPBP4RNAi慢病毒載體，以用作后續(xù)實驗，并檢測在這兩種肝癌細胞中GTPBP4基因沉默的效果；2、用篩選出的最有效GTPBP4RNAi慢病毒載體感染人肝癌SMMC7721細胞和MHCC97H細胞后，分別用Transwell侵襲實驗和細胞劃痕實驗檢測GTPBP4基因沉默后對肝癌細胞侵襲能力及遷移能力造成的影響。實驗分為3組：正常組、陰性對照組（NC組）、實驗組（最有效慢病毒感染組）。3、Weste

4、rnBlot檢測GTPBP4基因沉默后MMP9的蛋白表達的變化。結(jié)果：結(jié)果：1、通過qRTPCR和WesternBlot法檢測，1、2、3號慢病毒在人肝癌SMMC7721細胞及MHCC97H細胞中，都能使GTPBP4達到基因沉默的效果（p0.05）。3、和相對應(yīng)的正常組及陰性對照組進行比較，感染GTPBP4RNAi慢病毒組（實驗組）人肝癌SMMC7721細胞和MHCC97H細胞的遷移能力均受到抑制（p0.05）。4、GTPBP4基因沉默