CD35和C4bp在兒童紫癜性腎炎中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景及目的：
　　過敏性紫癜（Henoch-Schonlein’s purpura，HSP）是兒童時(shí)期一種常見的系統(tǒng)性血管炎疾病，伴有腎臟受累時(shí)稱紫癜性腎炎（Henoch-Schonlein’s purpura nephritis，HSPN），其病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。大量文獻(xiàn)研究表明，補(bǔ)體系統(tǒng)的激活參與了HSP和HSPN的發(fā)生發(fā)展。C3是血漿中濃度最高的補(bǔ)體成分，是三條補(bǔ)體激活途徑的共同組成成份，C4是補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑的重要

2、組成成分。血液中補(bǔ)體受體1( complement receptor1，CR1，也稱CD35)約85％表達(dá)于紅細(xì)胞表面，可以黏附免疫復(fù)合物轉(zhuǎn)移至肝、脾被巨噬細(xì)胞清除，此效應(yīng)是機(jī)體清除循環(huán)免疫復(fù)合物的重要機(jī)制。同時(shí)CD35分子是重要的補(bǔ)體受體分子，能與補(bǔ)體激活過程中所形成的活性片段相結(jié)合，介導(dǎo)多種生物學(xué)效應(yīng)。C4結(jié)合蛋白（C4 binding protein，C4bp）是重要的補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白，通過調(diào)節(jié)補(bǔ)體激活途徑中關(guān)鍵酶而控制補(bǔ)體活化強(qiáng)度和

3、范圍。CD35和C4bp均可阻斷C3轉(zhuǎn)化酶C4b2a形成，或使已形成的C4b2a滅活，從而調(diào)控補(bǔ)體經(jīng)典途徑的活化。本研究通過檢測HSPN患兒血和腎臟組織中CD35、C4bp的表達(dá)情況，探討其與腎臟病理損害的聯(lián)系，進(jìn)一步明確紅細(xì)胞免疫功能及補(bǔ)體系統(tǒng)在HSPN發(fā)生發(fā)展中的作用，從而為HSPN的防治提供新的科學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　選取2012年12月至2014年10月在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒內(nèi)科診斷為HSP的70例患兒為研

4、究對象，其中HSP無腎臟損害組30例(HSP組，n=30例)， HSP腎臟損害組40例(HSPN組，n=40例)。同時(shí)選取20例我院健康體檢同齡兒童為正常健康對照組（正常健康對照組，n=20例），5例因外傷腎切除的組織作為正常對照組（正常對照組，n=5例）。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測各組紅細(xì)胞膜CD35表達(dá)水平；應(yīng)用速率散射比濁法檢測各組血清中補(bǔ)體C3、C4的含量；采用ELISA法檢測各組血C4bp、循環(huán)免疫復(fù)合物（circulating im

5、mune complexes，CIC）的水平；采用免疫組化法檢測40例HSPN患兒腎活檢石蠟包埋組織CD35和C4bp的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1. HSPN組、HSP組及正常健康對照組血清C3水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2.472，P＞0.05）；HSPN組、HSP組及正常健康對照組血清C4水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2.579，P＞0.05）；HSPN組及HSP組紅細(xì)胞表面分子CD35平均熒光強(qiáng)度均顯著低于正常健

6、康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=10.510，P<0.05），同時(shí)HSPN組也低于HSP組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）； HSPN組及HSP組血清C4bp水平均顯著高于正常健康對照組（x2=9.582，P<0.05），同時(shí)HSPN組與HSP組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.007， P<0.05）；HSPN組及HSP組血清CIC水平均顯著高于正常健康對照組（x2=6.545，P<0.001），同時(shí)HSPN組與HSP組比較差異有統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)意義（Z=-2.053，P<0.05）。
　　2.正常對照組腎小球上皮細(xì)胞可見斑片狀CD35表達(dá)，腎小管和腎間質(zhì)CD35的表達(dá)多為陰性；HSPN組患兒腎小球CD35呈斑點(diǎn)狀表達(dá)，腎小管和腎間質(zhì)CD35的表達(dá)均為陰性。HSPN組患兒腎組織CD35表達(dá)水平顯著低于正常對照組，且隨病理級別增加而減弱（F=14.626，P<0.05）。
　　3.正常對照組腎組織中腎小球、腎小管和腎間質(zhì) C4bp的表達(dá)多為陰性，偶有個(gè)別腎小球、腎

8、小管及腎間質(zhì)中可見散在的C4bp少量表達(dá)；HSPN患兒腎小球、腎小管及腎間質(zhì)均可見斑點(diǎn)狀分布的C4bp陽性表達(dá)。HSPN患兒腎組織C4bp表達(dá)水平顯著高于正常對照組，且隨病理級別增加而增強(qiáng)（F=18.907， P<0.05）。
　　4. HSPN組患兒中，紅細(xì)胞膜CD35水平與腎臟CD35表達(dá)強(qiáng)度呈顯著正相關(guān)（r=0.489，P＜0.01）；與腎臟病理級別呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.615，P＜0.01）；腎臟CD35表達(dá)強(qiáng)度與腎臟病

9、理級別也呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.386，P＜0.05）。
　　5. HSPN組患兒中，血C4bp水平與腎臟C4bp表達(dá)強(qiáng)度無相關(guān)（P＞0.05）；與腎臟病理級別無相關(guān)（P＞0.05）；而腎臟C4bp表達(dá)強(qiáng)度與腎臟病理級別顯著正相關(guān)（r=0.528，P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.兒童HSPN的發(fā)生、發(fā)展過程中存在紅細(xì)胞膜上CD35及腎組織CD35的表達(dá)水平下降，CD35可能參與了兒童HSPN的發(fā)病機(jī)制。