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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討AQP1和AQP2在SD大鼠神經(jīng)病理性疼痛坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(CCI)模型中的作用。
方法:健康雄性SD大鼠25只,體重220-260g,隨機(jī)分為5組(n=5):A組(大鼠建立CCI模型后再觀察4天處死即自實(shí)驗(yàn)開(kāi)始,觀察6天處死)、B組(大鼠建立CCI模型后再觀察7天處死)、C組(大鼠建立CCI模型后再觀察14天處死)、D組(正常組:不做任何處理,觀察16天同C組一起處死)、E組(假手術(shù)組:暴露左側(cè)坐骨神經(jīng)中
2、段僅繞線,不結(jié)扎,觀察16天同C組一起處死)。分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始的第1天、第3天、第6天、第9天和第16天,即建模前1天、建模后第1、4、7、14天測(cè)量所有未處死大鼠雙后肢的熱痛閾和機(jī)械痛閾(PWTL和PWMT)。A組于CCI術(shù)后第4天后處死;B組于CCI術(shù)后第7天處死;C組、D組、E組均于CCI后第14天處死)。取L4-5脊髓節(jié)段,免疫組化法觀察AQP1和AQP2在脊髓的定位分布和表達(dá)變化,RealtimePCR法檢測(cè)脊髓AQP1和AQP
3、2的mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:1.CCI大鼠痛閾的變化:結(jié)扎左側(cè)坐骨神經(jīng)的CCI各組大鼠從CCI術(shù)后第1天出現(xiàn)機(jī)械痛敏,術(shù)后第4天出現(xiàn)熱痛敏(P<0.05)。
2.AQP1和AQP2在脊髓的定位和分布:AQP1和AQP2免疫組化陽(yáng)性顆粒在各組脊髓灰質(zhì)神經(jīng)元中廣泛分布,CCI組大鼠的脊髓背角AQP1和AQP2陽(yáng)性顆粒的平均光密度和面積較脊髓其他區(qū)域大,左側(cè)背角的平均光密度和面積高于右側(cè)背角。B組、C組大鼠的脊髓背
4、角AQP1和AQP2陽(yáng)性顆粒的平均光密度和面積高于正常對(duì)照組和假手術(shù)組。
3.大鼠脊髓AQP1、AQP2的mRNA表達(dá)變化:
AQP1的mRNA含量:RealtimePCR顯示CCI各組大鼠脊髓AQP1mRNA含量與正常組和假手術(shù)組間有差別(P<0.05)。D組與E組之間無(wú)差別(p>0.05)。A組、B組、C組大鼠脊髓AQP1的mRNA含量分別為D組含量的1.688倍、4.876倍、5.806倍。
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