DSG2-F536C轉(zhuǎn)基因小鼠心臟結(jié)構(gòu)和功能及心電表型的初步研究.pdf

1、第一部分應(yīng)用超聲心動(dòng)圖評(píng)估DSG2-F536C突變對(duì)小鼠心室結(jié)構(gòu)和功能的影響
　　背景:本課題組在一個(gè)致心律失常性右心室心肌病(arrhythmogenic rightventricular cardiomyopathy，ARVC)家系中檢出DSG2-F531C突變，進(jìn)而構(gòu)建出DSG2-F536C轉(zhuǎn)基因小鼠，病理學(xué)研究證實(shí)其右室出現(xiàn)纖維化和脂肪化等表型，提示該突變具有致病性，但DSG2-F536C轉(zhuǎn)基因小鼠心臟結(jié)構(gòu)和功能的具體改變

2、尚需進(jìn)一步研究。
　　目的:應(yīng)用超聲心動(dòng)圖評(píng)估10周齡DSG2-F536C轉(zhuǎn)基因小鼠心室結(jié)構(gòu)和功能的變化。
　　方法:根據(jù)不同基因型將DSG2-F536C轉(zhuǎn)基因小鼠分為3組，分別為野生型C57BL/6J小鼠（DSG2wt/wt，WT組）、雜合子突變組（DSG2mt/wt，H組）和純合子突變組（DSG2mt/mt，HM組）。檢查時(shí)間均為10周齡，雌雄不限，在麻醉狀態(tài)下行經(jīng)胸超聲心動(dòng)圖檢查，觀察三組小鼠心室結(jié)構(gòu)和功能的變化。

3、r>　　結(jié)果:每組分別完成8只小鼠的超聲心動(dòng)圖檢查，結(jié)果顯示:(1)與WT組相比，HT組和HM組小鼠左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)均顯著降低(HT組vs WT組，44.4±6.6％ vs57.5±3.8％,p＜0.01; HM組vs WT組，36.3±6.7 vs57.5±3.8％,p＜0.01),HM組則較HT組小鼠進(jìn)一步降低(36.3±6.7％ vs44.4±6.6％，p＜0.05);(2)與WT組小鼠相比，HT組和HM組小鼠左室短軸縮短

4、分?jǐn)?shù)(LVFS)均顯著降低(HT組vs WT組，21.8±3.7％ vs29.7±2.6％，p＜0.01; HM組vs WT組，17.1±3.3％vs29.7±2.6％，p＜0.01)，HM組小鼠則較HT組小鼠進(jìn)一步降低(17.1±3.3％ vs21.8±3.7％，p＜0.01);(3)與WT組小鼠相比，HT組小鼠左室收縮末期內(nèi)徑(LVIDs)(3.2±0.19mm vs2.6±0.19mm，P＜0.01)和左室舒張末期內(nèi)徑(LVIDd

5、)（4.1±0.14mm vs3.7±0.23mm，P＜0.05）均顯著增加，HM組亦呈增大趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，HT組與HM組間無(wú)明顯差異;(4)與WT組小鼠相比，HT組和HM組左室收縮末期后壁厚度(LVPWs)均顯著變?。℉T組vs WT組，1.0±0.11mm vs1.2±0.15mm，P＜0.01;HM組vs WT組，0.95±0.15mm vs1.2±0.15mm，P＜0.01），但HM組和HT組間則無(wú)顯著差異;(5)與WT組

6、小鼠相比，HM組小鼠收縮末期室間隔厚度(IVSs)顯著變?。?.93±0.1mm vs1.1±0.1mm，P＜0.01），HT組與WT組、HT組與HM組間比較無(wú)明顯差異;(6)與WT組小鼠相比，HT組和HM組小鼠右室舒張末期內(nèi)徑(RVIDd)均增加，但均未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（HT組vs WT組，0.48±0.32mm vs0.31±0.23mm，P＞0.05;HM組vs WT組，1.1±0.86mm vs0.31±0.23mm,P＞0.05）

7、。
　　結(jié)論:10周齡DSG2-F536C轉(zhuǎn)基因小鼠出現(xiàn)顯著的左室收縮功能下降、左心室收縮和舒張末期內(nèi)徑增大、左室后壁與室間隔厚度變薄等結(jié)構(gòu)和功能的改變。
　　第二部分 DSG2-F536C轉(zhuǎn)基因小鼠心電表型的初步研究
　　背景: DSG2-F536C突變除了引起小鼠心臟結(jié)構(gòu)和功能的改變，病理檢查還提示明顯的右心室受累為主的纖維化、鈣化和脂肪化，伴有縫隙連接蛋白43(CX43)和鈉通道的低表達(dá)。上述改變理論上可能導(dǎo)致心

8、電學(xué)異常，包括局部心肌雙極或單極電壓偏低，心肌間傳導(dǎo)延緩，自律性增高、觸發(fā)活動(dòng)和折返激動(dòng)相關(guān)的室性心律失常發(fā)作增多，嚴(yán)重者可因惡性室性心律失常導(dǎo)致心源性猝死。
　　目的:觀察DSG2-F536C突變小鼠心電圖指標(biāo)、基線與藥物激發(fā)后室性心律失常的發(fā)生情況和心外膜單極電壓標(biāo)測(cè)的變化，評(píng)估DSG2-F536C突變對(duì)小鼠室性心律失常易感性的影響。
　　方法:根據(jù)基因型將DSG2F536C突變轉(zhuǎn)基因小鼠分為3組:WT組、HT組和HM組

9、，均為10周齡，觀察比較以下指標(biāo):(1)記錄小鼠基線體表心電圖，采集分析心率(HR)、PR間期、QRS波寬度和QT間期等指標(biāo);(2)觀察不同組間基線和腎上腺素激發(fā)后室性早搏(PVC)和室性心動(dòng)過(guò)速(VT)的發(fā)生情況;(3)小鼠開(kāi)胸心外膜左室和右室單極電壓標(biāo)測(cè)，觀察不同組間心外膜左、右心室單極電壓的變化。
　　結(jié)果:(1)體表心電圖指標(biāo):HM組小鼠心率較WT組和HT組小鼠均顯著增快（HM組vs WT組，436.3±25.4bpm v

10、s358.7±30bpm，P＜0.01;HM組vs HT組，436.3±25.4bpm vs366.3±49.4bpm，P＜0.05），而HT組和WT組間無(wú)明顯差異;HM組小鼠QRS波寬度較WT組和HT組小鼠QRS波均顯著增寬（HM組vs WT組，12.3±1.2ms vs11.2±0.4ms,P＜0.05; HM組vs HT組，12.3ms±1.2 vs10.6±0.5ms,P＜0.01)，而HT組和WT組間無(wú)顯著性差異;突變小鼠的P

11、R間期和QT間期均有延長(zhǎng)的趨勢(shì)，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2) WT組和HT組小鼠在基線和腎上腺素激發(fā)前后均未出現(xiàn)PVC及VT，而HM組給予腎上腺素前有1只小鼠自發(fā)出現(xiàn)PVC和VT，給予腎上腺素后有2只小鼠出現(xiàn)PVC和VT;(3)心外膜單極電壓標(biāo)測(cè):HM組小鼠右室單極電壓均較WT組和HT組小鼠顯著降低（HM組vs WT組，0.68±0.33mv vs1.7±0.37mv,P＜0.01;HM組vs HT組0.68±0.33mv vs1.5±0.