腹膜透析相關(guān)性腹膜炎致病菌PCR檢測(cè)和傳統(tǒng)培養(yǎng)對(duì)比分析.pdf

1、目的:
　　應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)檢測(cè)腹膜透析相關(guān)性腹膜炎(peritoneal dialysis related peritonitis,PDRP)患者腹透液致病菌分布，與傳統(tǒng)培養(yǎng)結(jié)果比較，旨在探討PCR在PDRP細(xì)菌檢測(cè)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　對(duì)象與方法:
　　1.收集2014年1月至12月入住安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院的40例PDRP患者腹透液，分為兩份，一份

2、行傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，另一份置于80℃保存，用于后續(xù)PCR檢測(cè)。
　　2.依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道并參考同期傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果，確立17種實(shí)驗(yàn)菌。
　　3.根據(jù)細(xì)菌16SrRNA基因設(shè)計(jì)細(xì)菌通用引物，并參考文獻(xiàn)設(shè)計(jì)17種實(shí)驗(yàn)菌的特異引物，提取標(biāo)本DNA后進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR(Real-time Polymerase Chain Reaction，qPCR)擴(kuò)增。標(biāo)準(zhǔn)菌株DNA提取液為陽(yáng)性對(duì)照，無(wú)菌雙蒸水為陰性對(duì)照。
　　4.將PC

3、R結(jié)果與常規(guī)培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行比較，用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行臨床資料數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果:
　　1.傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示：40例標(biāo)本陽(yáng)性率為65.00％(26/40)，以G+球菌為主，占69.23%（18/26），主要菌種為：表皮葡萄球菌(13.89%)、溶血葡萄球菌(11.11%)、大腸桿菌(11.11%)、金黃色葡萄球菌(8.33%)。
　　2.患者的一般資料顯示，培養(yǎng)陽(yáng)性組入院時(shí)腹透液白細(xì)胞計(jì)數(shù)及CRP值明顯高于

4、陰性組（P<0.05），幾乎全部患者均有腹痛、腹透液渾濁、壓痛反跳痛等臨床癥狀和體征，陽(yáng)性組中6例有既往感染史，陰性組為3例，兩組其余各指標(biāo)間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3.PCR結(jié)果顯示：40例標(biāo)本總陽(yáng)性率為82.50%(33/40)，除2例未測(cè)出具體菌種外，余主要菌種與普通培養(yǎng)結(jié)果無(wú)異。4.以細(xì)菌培養(yǎng)作為金標(biāo)準(zhǔn)，PCR技術(shù)對(duì) PDRP致病菌檢測(cè)的敏感性為96.15%，特異性為42.86%，且檢出陽(yáng)性率明顯高于普通培養(yǎng)法，二者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)