江西烯酮酯jiangxienone抑制腫瘤細胞生長的細胞毒效應(yīng)機制.pdf

1、目的:探討江西烯酮酯jiangxienone抑制腫瘤細胞生長的細胞毒效應(yīng)機制,為進一步開發(fā)利用該化合物提供實驗依據(jù)。
　　 方法:利用SRB法評估江西烯酮酯對胃癌細胞株的細胞毒效應(yīng),采用CFU-F法測定江西烯酮酯抗癌細胞的效能比;通過SSH技術(shù)克隆江西烯酮酯對胃癌細胞株作用的差異表達基因,分析該化合物可能作用的靶基因:利用基因芯片技術(shù)在基因組水平上分析該化合物對胃癌細胞株的基因表達譜的影響,并借助生物信息學(xué)技術(shù)分析該化合物對細胞

2、分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的影響;結(jié)合SSH和基因芯片檢測結(jié)果擬定該化合物作用胃癌細胞的靶基因,進而利用熒光定量PCR技術(shù)、凝膠阻滯實驗、紫外吸收光譜和單細胞凝膠電泳法闡明該化合物的抗腫瘤細胞毒效應(yīng)機制。
　　 結(jié)果:江西烯酮酯對SGC-7901,MGC80-3,HGC-27的IC50分別為1.38、2.48、2.31μM。DDP對SGC-7901細胞的IC50為22.04μM;江西烯酮酯對小鼠骨髓基質(zhì)細胞及胃癌細胞SGC-7901細胞集落形

3、成的IC50分別為7.45,6.64.μM,效能比為1.12;SSH實驗共得到38個差異表達基因,其中和癌癥密切相關(guān)的基因有15個,分別參與DNA損傷修復(fù)、細胞周期、免疫及凋亡等生命過程;基因芯片分析的結(jié)果表明,江西烯酮酯藥物組與溶劑對照組相比,涉及到1452個基因的表達改變,其中621個基因表達上調(diào),831個基因表達下調(diào)。在表達發(fā)生改變的基因中,有61個功能明確的癌癥相關(guān)基因,其中有15個基因與DNA損傷修復(fù)有關(guān),其他基因分別涉及到腫