2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  觀察脂氧素A4(LXA4)誘導(dǎo)血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表達對腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor a,TNF-α)引起人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(Human pulmonary microvascular endothelia cells,HPMEC)炎癥損傷的保護作用及相關(guān)通路PI3K/Akt影響的機制。
  方法:
  實驗分為兩部分:
  (

2、1)針對LXA4誘導(dǎo)HO-1表達的通路研究,實驗分組為:對照組、LXA4(50ng/mL)處理組、抑制劑(LXA450ng/mL+LY29400220μ M)干預(yù)組、激動劑組(IGF-150ng/mL)。蛋白質(zhì)免疫印跡(WesternBlotting)對PI3K/Akt通路中關(guān)鍵蛋白p-Akt、Akt,HO-1及其調(diào)控關(guān)鍵蛋白p-Nrf2、Nrf2、Keap1、核內(nèi)Nrf2進行定量檢測,細(xì)胞免疫熒光對Nrf2核內(nèi)外表達進行定位檢測;

3、r>  (2)針對LXA4對炎癥損傷的保護作用的研究,實驗分組為:對照組、TNF-a刺激組(50ng/mL)、LXA4干預(yù)組(TNF-a50ng/mL+LXA450ng/mL)、抑制劑組(Znpp-IX0.5μ M預(yù)處理12H,TNF-a50ng/mL+LXA450ng/mL)。通過BCECF/AM熒光標(biāo)記THP-1細(xì)胞對HPMEC黏附性進行檢測分析,通過JC-1線粒體膜電位試劑盒對HPMEC線粒體膜電位進行檢測。
  結(jié)果:

4、r>  (1)LXA4引起HO-1蛋白表達增高呈劑量相關(guān)性,且在50ng/ml時差異顯著;
  (2)LXA4通過激活PI3K/Akt通路引起Nrf2磷酸化,同時LXA4引起Keap1構(gòu)型該表,導(dǎo)致Nrf2與Keap1聚合體解聚,Nrf2轉(zhuǎn)入核內(nèi)與ARE結(jié)合域結(jié)合,上調(diào)HO-1表達,對細(xì)胞起保護作用;
  (3)LXA4通過HO-1逆轉(zhuǎn)TNF-α導(dǎo)致線粒體膜電位改變減輕HPMEC細(xì)胞凋亡水平發(fā)揮細(xì)胞保護作用;
  (4

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