17-AAG對EBV陽性腫瘤細胞LMP1表達及細胞增殖的影響.pdf

1、熱休克蛋白90(Heat Shock Proein90，HSP90)是一種非常重要的分子伴侶，其底物蛋白是許多信號通路中的蛋白激酶和轉(zhuǎn)錄因子。潛伏膜蛋白1(Latent membrane protein1，LMP1)是EB病毒(Epsein Barr Virus，EBV)潛伏感染期表達的主要癌蛋白，HSP90抑制劑17-AAG已被證實能夠抑制LMP1表達，其對表達LMP1的EBV陽性腫瘤細胞的影響有待深入研究。
　　目的：探討HS

2、P90抑制劑17-AAG對EBV陽性腫瘤細胞LMP1表達的影響以及對細胞增殖的抑制作用，明確17-AAG在STAT3信號通路中可能的作用機制。
　　方法：(1)選取表達LMP1的EBV陽性伯基特淋巴瘤細胞系Raji，EBV陽性鼻咽癌細胞系C666及EBV陽性胃癌上皮細胞系GT38作為研究對象，分別施加不同濃度的17-AAG進行處理，采用Quantitative real-time PCR(qRT-PCR)檢測不同濃度17-AAG處

3、理對LMP1表達的影響。(2)MTT法檢測17-AAG對表達LMP1的EBV陽性胃癌細胞系GT38、不表達LMP1的EBV陽性胃癌細胞系SNU719、EBV陰性胃癌細胞系SGC7901的生長抑制率。(3)Western-blotting檢測17-AAG對GT38細胞系中STAT3及其下游抗凋亡基因survivin表達的影響。
　　結(jié)果：(1) qRT-PCR方法結(jié)果顯示，三組細胞系DMSO對照組與空白對照組表達無統(tǒng)計學(xué)差異；施加3

4、μM、1μM、0.3μM、0.1μM濃度17-AAG的Raji細胞系中LMP1的表達量分別降低為空白對照組的0.38、0.33、0.65、0.77倍，GT38細胞系降低為空白對照組的0.47、0.52、0.96、0.94倍，C666細胞系降低為空白對照組的0.22、0.18、0.34、0.36倍。三組細胞系各濃度組間表達量均有統(tǒng)計學(xué)差異，P＜0.05。(2) MTT檢測結(jié)果顯示，不同濃度17-AAG對SNU719、SGC7901均有抑制

5、作用，隨濃度增加及作用時間延長，抑制率逐漸增大，1μM濃度組抑制率在第六天可達到100％；不同濃度17-AAG對GT38細胞系的抑制作用更加明顯，3μM及1μM濃度抑制作用基本相似，在第四天抑制率即可達到100%。(3)Western-blotting結(jié)果顯示，17-AAG能夠使GT38細胞系中STAT3及survivin表達降低。
　　結(jié)論：17-AAG能夠抑制EBV陽性腫瘤細胞LMP1的表達及腫瘤細胞增殖，其機制可能是通過抑制