應(yīng)用RNA干擾技術(shù)抑制膠質(zhì)瘤PLK1基因表達的實驗研究.pdf

1、第一部分 膠質(zhì)瘤PLK1的表達與增殖活性及預(yù)后的關(guān)系 目的:檢測人膠質(zhì)瘤組織上Polo樣激酶1(PLK1)的表達,探討PLK1表達與膠質(zhì)瘤增殖活性、臨床病理、患者年齡、腫瘤大小和預(yù)后的關(guān)系.方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測47例膠質(zhì)瘤和4例正常腦組織中PLK1和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達,并隨訪病人.分析PLK1與膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖活性、惡性程度、年齡、腫瘤大小和預(yù)后的關(guān)系.第二部分 攜帶EGFP的shPNA真核表達載體的構(gòu)建 目的:構(gòu)

2、建攜帶EGFP的短發(fā)夾環(huán)RNA(shRNA)真核表達載體.結(jié)論:成功構(gòu)建攜帶EGFP的shRNA真核表達載體.第三部分 PLK1基因沉默對U251膠質(zhì)瘤生長的抑制作用 目的:將設(shè)計合成的短發(fā)夾狀RNA(short hairpin RNA,shRNA)導(dǎo)入該課題構(gòu)建的真核表達載體中,使其在細(xì)胞內(nèi)高效轉(zhuǎn)錄,觀察shRNA對U251細(xì)胞PLK1的抑制作用,及其對細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響,探討PLK1在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用和RNA干擾技術(shù)在

3、人膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中的應(yīng)用,尋找更為有效的膠質(zhì)瘤治療途徑.第四部分 pEGFP-H1載體介導(dǎo)的VEGF shRNA治療人膠質(zhì)瘤的實驗研究 目的:構(gòu)建針對血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的短發(fā)夾環(huán)RNA質(zhì)粒(pEGFPH1/VEGF),觀察其在體內(nèi)外對膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U251生長的抑制作用.第五部分 GDNF/EGFP融合基因修飾的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞對多巴胺能神經(jīng)元的保護作用 目的:構(gòu)建膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell line-deriv