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文檔簡介
1、赭曲霉毒素A(OA)是曲霉菌屬和青霉菌屬的某些產毒菌株的次級代謝產物,對農作物的污染在全球范圍內都比較嚴重,是一種強烈的腎毒素和肝毒素,還具有免疫抑制性,并有致畸、致癌和致突變的作用。 目前OA的檢測技術主要有儀器法和免疫分析技術。儀器法主要有薄層色譜法,高效液相色譜法以及質譜聯(lián)合法等,這些方法樣品處理繁瑣費時,成本高,而且需要有經(jīng)過專門訓練的專業(yè)人員來操作復雜的儀器設備,不適合大批量樣品的測定。免疫分析技術主要是酶聯(lián)免疫吸附測
2、定(ELISA),作為一種快速、靈敏、特異的檢測方法,正逐漸應用于毒素的殘留檢測。本研究通過抗原的合成和抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的研制,建立了OA的ELISA檢測方法。 利用試劑盒偶聯(lián)的OA-BSA為免疫原免疫6周齡BALB/c小鼠,采其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融合,用間接EIASA以及間接競爭ELISA篩選,經(jīng)五次亞克隆得到了穩(wěn)定分泌抗OA單克隆抗體的雜交瘤細胞株D6。特異性試驗證明D6株單抗有較強的特異性。 依照
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