胃內(nèi)乳酸桿菌和幽門螺旋桿菌數(shù)量及比例變化與幾種常見胃部疾病關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景與目的：研究幾種常見胃部疾病胃內(nèi)乳酸桿菌(Lactobacillus)和幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori)的數(shù)量及比例情況，并探討胃內(nèi)微生態(tài)與胃部疾病間的關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)材料與方法： 在胃鏡下采取未經(jīng)抗生素治療過的慢性淺表性胃炎(CSG)、慢性萎縮性胃炎(CAG)、消化性潰瘍(PU)、胃癌(GC)患者的胃粘膜活檢組織標(biāo)本，將所取標(biāo)本用20％糖水保存轉(zhuǎn)送至實(shí)驗(yàn)室，用搗碎棒或消毒棉桿將組織搗碎以釋放出組織中

2、的細(xì)菌，再用PBS將原液稀釋成三個(gè)不同的稀釋度進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)條件：HP在厭氧培養(yǎng)箱中微需氧和37°C，用真空泵將培養(yǎng)罐內(nèi)氣壓抽至O或接近O，立即沖入不含氧氣的混合氣(5％H<,2>、10％CO<,2>、85％的N<,2>)，并在培養(yǎng)罐中放入一敞口平皿的無菌水，以保證培養(yǎng)濕度。用布氏肉湯加瓊脂、兔血、可溶性淀粉及選擇性抗生素以抑制其他細(xì)菌的生長(zhǎng)，培養(yǎng)3—5天。乳桿菌用標(biāo)準(zhǔn)MRS培養(yǎng)基進(jìn)行厭氧培養(yǎng)(燭缸內(nèi)加干燥劑，并放入點(diǎn)燃的蠟燭，密閉，讓

3、蠟燭將缸內(nèi)的氧氣燃盡。)，放入37°C恒溫箱培養(yǎng)3天。 取菌落生長(zhǎng)較好的培養(yǎng)平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，伺時(shí)觀察菌落形態(tài)，挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色涂片，并進(jìn)行純培養(yǎng)。 分別取乳桿菌、幽門螺桿菌菌落，革蘭氏染色，光學(xué)顯微鏡下觀察菌體形態(tài)學(xué)、染色性，并照相。進(jìn)一步用生化反應(yīng)對(duì)菌種進(jìn)行鑒定。最后，用APl50CHL乳酸桿菌系統(tǒng)生化鑒定卡對(duì)乳酸桿菌做最終的分型鑒定。結(jié)果： 1．對(duì)培養(yǎng)出的細(xì)菌進(jìn)行鑒定1.1培養(yǎng)出的乳桿菌菌落呈乳白色，

4、突出，光滑，邊緣整齊，G+，短桿狀，球形呈單、雙或鏈狀排列。生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果：乳桿菌極少見硝酸鹽還原反應(yīng)、不液化明膠、不產(chǎn)生靛基質(zhì)和硫化氫。1．2幽門螺桿菌菌落呈透明針樣，光滑，突出菌落，S狀，海歐狀，C形，幽門螺桿菌為革蘭氏陰性，。生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果：幽門螺桿菌尿素酶、觸媒、氧化酶均為陽性。 以上結(jié)果說明在胃部疾病患者的胃粘膜內(nèi)同時(shí)存在乳桿菌和幽門螺桿菌。 2．不同胃部疾病患者胃內(nèi)乳桿菌和幽門螺桿菌數(shù)量的分析 2．1幾種常見胃

5、部疾病患者胃內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量比較 四組人群比較，方差分析0.01

6、檢驗(yàn)潰瘍組與胃癌組比較、重度胃炎組與胃癌組比較、慢性淺表性胃炎組與胃癌組比較0.0l0.05。 以上結(jié)果說明：幾種常見胃部疾病患者胃內(nèi)幽門螺桿菌數(shù)量具有差異性，且隨著疾病的嚴(yán)重程度的增加幽門螺桿菌數(shù)量呈增加趨勢(shì)。 3．不同胃部疾病患者胃內(nèi)幽門螺桿菌與乳酸桿菌(H／L)的比值 3.1慢性淺表性胃炎的比值最小，慢性萎