BORIS和CT45兩種新的CT抗原單克隆抗體的制備及其蛋白水平表達和分布的初步研究.pdf

1、隨著腫瘤免疫學的發(fā)展，越來越多的腫瘤相關抗原被應用于腫瘤的免疫研究中。腫瘤/睪丸抗原（Cancer/Testis Antigens, CTA）具有可局限性表達于腫瘤組織并且可以在腫瘤患者體內(nèi)引起免疫反應等特點,因而成為近年來腫瘤免疫研究的熱點。但是目前CT 抗原的研究大多停留在DNA 及mRNA 的水平上，蛋白水平上的研究還相對滯后，主要原因是缺乏特異性強﹑敏感性高的單克隆抗體。 BORIS 和CT45 是兩種新近發(fā)現(xiàn)的CT 抗

2、原，為了進一步在蛋白水平上對其進行研究，我們首次制備BORIS 及CT45 的單克隆抗體，并對其在蛋白水平上的表達和分布進行了初步的研究。 應用淋巴細胞雜交瘤技術，制備和鑒定了BORIS 和CT45 兩種CT 抗原的單克隆抗體，并篩選出特異性強及敏感性高能識別天然抗原的相應單克隆抗體：FMU-BORIS13 和CT45-03，免疫組織化學染色最佳工作濃度分別為4.5μg/ml 和2.6μg/ml。以獲得的單抗為工具，運用免疫組織

3、化學染色的方法在睪丸組織﹑正常乳腺組織﹑乳腺良性疾病組織﹑乳腺癌及肺癌組織上對兩種CT 抗原在蛋白水平上的分布進行了初步的研究。結果發(fā)現(xiàn)在睪丸組織中：兩種CT 抗原主要分布在生精細胞發(fā)育的早期即主要表達在精原細胞及初級精母細胞的細胞核中。在乳腺癌組織中BORIS 呈高水平的表達，表達率為85.5％ (94/110)；在正常乳腺組織及乳腺良性疾病組織中也檢測到了BORIS 的表達,但表達水平遠低于乳腺癌組織；在肺癌組織中CT45 表達百分