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1、近幾年,細(xì)胞角蛋白重新成為人們研究的熱點,它與細(xì)胞生命活動和生物行為改變的關(guān)系日益受到關(guān)注,這一細(xì)胞骨架成分在腫瘤的診斷、療效監(jiān)測中應(yīng)用越來越廣.該論文研究了其單克隆抗體的制備,建立了針對這一細(xì)胞成分的免疫分析方法,并將其初步應(yīng)用于臨床診斷.提取純化人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29細(xì)胞角蛋白成分(命名為TP21),以此為免疫原,經(jīng)過細(xì)胞融合、亞克隆篩選和ProteinG親和層析純化最終得到四株單克隆抗體:1-6、H13、H16、CY19.四株抗
2、體純度大于95﹪(SDS-PAGE);1-6、H13、H16為IgG1,CY19為IgG2a;H16、CY19對TP21的親和常數(shù)分別為1.21×10<'8>L/mol和1.36×10<'8>L/mol,H13與1-6的親和常數(shù)亦在10<'7>L/mol數(shù)量級;免疫組織中,1-6特異性識別肌源性組織,H13、H16、CY19識別上皮組織抗原,H16嶼CY19表現(xiàn)出相似的免疫組化染色特征.使用棋盤實驗篩選出能夠形成雙位點夾心的一對抗體,探
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