2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、蠅類屬節(jié)肢動物門,昆蟲綱,雙翅目,環(huán)裂亞目,其免疫防御系統(tǒng)不同于脊椎動物,一般認為不存在適應(yīng)免疫。近年來,人們也開始在蠅類中探索免疫系統(tǒng)的起源和進化,為研究昆蟲天然免疫和人類的天然免疫的相關(guān)性提供依據(jù)。蠅類在長期的進化過程中形成了自身獨特的免疫機制,即缺乏哺乳動物所具有的適應(yīng)性免疫系統(tǒng),體內(nèi)沒有T細胞和B細胞,也沒有抗體、補體系統(tǒng)。那么,它們在受到外界病原生物侵襲時,其分子免疫機制及效應(yīng)免疫分子的表達情況是怎么樣的呢?本文擬采用SSH、

2、Real-time PCR等技術(shù),以家蠅(Musca domestic)為材料,就此問題進行初步探討。 1.家蠅最佳感染條件的確定。用三種常見的生物致病菌即金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli),球孢白僵菌(Beauveria bassiana Vuill),感染家蠅,觀察其感染后的性狀變化及存活率。發(fā)現(xiàn)它們引起家蠅有效感染的LC50分別為金葡菌(cells/

3、ml)LC50約為1010 cells/ ml,大腸桿菌為大于109 cells/ml,球孢白僵菌為OD600值1.98的菌濃度。 2.抑制性消減雜交(SSH)結(jié)果及分析。成功構(gòu)建了家蠅抗感染差異表達cDNA文庫。文庫擴增后進行PCR鑒定,挑取252個白色陽性克隆,表明插入片段主要分布在250~750bp之間。應(yīng)用反向Northern斑點雜交技術(shù)從消減cDNA文庫中高通量篩選了35個差異表達的克隆,其中32個為真陽性。得到252

4、個測序后,根據(jù)在GenBank非冗余核酸數(shù)據(jù)庫(nr)和EST數(shù)據(jù)庫中BLASTn序列比對結(jié)果,代表已知基因的ESTs按照基因功能分為八類:信號轉(zhuǎn)導與細胞間通信、細胞結(jié)構(gòu)與運動、細胞凋亡、細胞與機體防御、物質(zhì)轉(zhuǎn)運、翻譯與表達調(diào)控、代謝及其它。結(jié)果顯示:家蠅具有與哺乳動物相似的急性期免疫反應(yīng)基因表達(如 proteases inhibitor, respiratory burst, lysozymes and antimicrobial

5、peptides, etc等)其表達模式也是相同的,但是存在于脊椎動物中的一些典型的急性期反應(yīng)蛋白,如C-reactive protein、serum amyloid P和serum amyloid A卻未能在家蠅中發(fā)現(xiàn),這又體現(xiàn)了這兩類物種面對不同環(huán)境和微生物的選擇壓力可能采取不同的策略。家蠅具有與哺乳動物相似的急性期免疫反應(yīng)基因,這為利用家蠅來研究免疫系統(tǒng)的進化提供了進一步的有力證據(jù)。但是,與脊椎動物相比,家蠅也有著一些其他的參與急

6、性期免疫反應(yīng)的基因,進一步研究這些發(fā)現(xiàn)的新基因?qū)⒂兄谌藗兩钊肓私饷庖呦到y(tǒng)起源和進化的分子基礎(chǔ)。 3.代表免疫效應(yīng)分子抗菌肽的時相表達模式研究??咕淖鰹橄夘愺w液免疫效應(yīng)分子的重要組成部分,我們對不同生長階段卵、一齡、二齡、三齡、蛹、成蟲,誘導后不同時期家蠅三齡幼蟲抗菌肽基因進行表達模式分析。結(jié)果顯示三種抗菌肽在家蠅體內(nèi)為組成性表達。在誘導后不同時間點,不同發(fā)育階段抗菌肽均普遍表達,但表達水平存在著明顯的差異,誘導后表達明顯升高

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