vWF和HDAC1對人胃癌細胞BGC-823生物學行為影響的實驗研究.pdf

1、目的：(1)研究血管性血友病因子(vWF)和組蛋白去乙?；?(HDACl)在人胃癌細胞BGC-823中的表達及其相互作用。 (2)探討vWF和HDACl對人胃癌細胞BGC-823增殖、細胞形態(tài)、粘附、侵襲和遷移能力的影響及其作用機制。 方法：(1)采用免疫組織化學技術(shù)及RT-PCR法檢測抗體作用前后vWF和HDACl蛋白及其mRNA在BGC-823細胞表達水平的變化。 (2)分別單獨及聯(lián)合應用vWF抗體(vWF

2、Ab)和HDACl抗體(HDACl Ab)處理細胞，采用MTT法、倒置顯微鏡、粘附抗體抑制實驗及Boyden小室法檢測vWF和HDACl對BGC-823細胞增殖、形態(tài)、粘附、侵襲和遷移能力的影響。 結(jié)果：(1)BGC-823細胞能夠表達vWF和HDACl蛋白及其mRNA；經(jīng)HDAClAb處理后，細胞中vWF mRNA相對含量由處理前的0.2134增加到0.3214，vWF蛋白表達增強；經(jīng)vWFAb處理后，細胞中HDACl mRN

3、A和蛋白的表達均無明顯變化。 (2)MTT法檢測顯示vWF Ab和HDACl Ab單獨及聯(lián)合作用均對BGC-823細胞增殖有抑制作用，隨著作用時間延長，抗體濃度增大，增殖抑制率增加，表明增殖抑制作用呈時效-量效關(guān)系，與對照組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 (3)細胞形態(tài)學觀察vWF Ab和HDACl Ab單獨及聯(lián)合作用均對細胞生長具有明顯的抑制作用，細胞形態(tài)改變，部分貼壁細胞收縮變圓、漂?。患毎麛?shù)目明顯減少，與對照組

4、比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 (4)粘附抗體抑制實驗結(jié)果顯示vWF Ab處理組胃癌細胞BGC-823的粘附率較未處理組明顯下降(P<0.01)；HDACl Ab處理組細胞粘附率與對照組比較無明顯變化；Ⅳ型膠原高濃度組較低濃度組細胞粘附率增大(P<0.01)。 (5)Boyden小室侵襲實驗結(jié)果顯示vWF Ab處理組細胞侵襲穿膜細胞數(shù)為54.86±9.94，與空白對照組85.86±25.02相比較差異具有統(tǒng)計學意義(

5、P<0.01)； HDAClAb處理組為85.80±7.42、聯(lián)合作用組為83.60±6.50，分別與對照組比較，侵襲穿膜細胞數(shù)差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 (6)Boyden小室遷移實驗結(jié)果顯示vWF Ab處理組細胞遷移穿膜細胞數(shù)為60.474±16.20，與空白對照組105.27±2.12相比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；HDAClAb處理組為99.26±10.4、聯(lián)合作用組為99.0±6.91，分別與對照組

6、比較，遷移穿膜細胞數(shù)差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結(jié)論： (1)人胃癌細胞BGC-823能夠表達vWF和HDACl蛋白及其mRNA；HDACl可調(diào)節(jié)vWF的表達。 (2)vWF和HDACl在體外能夠影響胃癌細胞BGC-823的增殖，并呈時間、劑量依賴性。兩者在體外能誘導細胞形態(tài)改變。 (3)vWF在體外能夠促進BGC-823細胞與細胞外基質(zhì)的粘附；且細胞與細胞外基質(zhì)的粘附呈時間依賴性；提示vWF在BGC-