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1、目的:構(gòu)建人DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)的短發(fā)夾RNA(shorthairpinRNA,shRRNA)慢病毒載體質(zhì)粒,進(jìn)行慢病毒包裝并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞KYSE150。
方法:將設(shè)計的基因片段合成所需的目的基因,并將目的基因插入慢病毒載體質(zhì)粒plenti-U6上。plenti-U6-DNMT1重組質(zhì)粒在293T細(xì)胞中進(jìn)行慢病毒包裝,用提取出來的病毒液感染KYSE150細(xì)胞。用
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