抗BCG HSP65單克隆抗體的制備.pdf

1、熱休克蛋白(Heat shock proteins,HSP)是一類在生物進(jìn)化過程中高度保守的蛋白質(zhì),原核和真核細(xì)胞中都有存在.為得到抗HSP65單克隆抗體,本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用雜交瘤細(xì)胞技術(shù)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞Sp2/0和經(jīng)HSP65抗原免疫的BALB/c小鼠的脾細(xì)胞融合,并經(jīng)過間接ELISA法檢測和有限稀釋法克隆培養(yǎng),得到了5株能持續(xù)分泌抗HSP65單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株.對這幾株細(xì)胞及其所分泌抗體的活性、穩(wěn)定性、特異性進(jìn)行了檢測,對所分泌抗體的

2、亞型進(jìn)行了鑒定分析.并對其中10B12株所分泌的抗體用辣根過氧化物酶標(biāo)記,進(jìn)行了初步的應(yīng)用.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,其中的4株雜交瘤細(xì)胞所分泌的單抗具有較高的生物活性和特異性,并在酸、堿、高、低溫等環(huán)境因素中基本保持穩(wěn)定.462、10B12的抗體亞型為IgG2a/κ,6C7、7F4、13C8的抗體亞型為IgG1/κ.此雜交瘤細(xì)胞系建立后,將可以得到抗HSP65單克隆抗體,為進(jìn)一步研究HSP65的生物活性奠定基礎(chǔ),并可用于建立一個對HSP65及其復(fù)