RPR1基因啟動子的克隆和化學誘導表達.pdf

1、復旦大學碩士學位論文RPR1基因啟動子的克隆和化學誘導表達姓名：趙向輝申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：蒯本科20050430摘要摘要植物系統(tǒng)獲得抗性(systemicacquiredresistance，SAR)是植物自身的一種免疫機制，是指植物受生物或化學因子刺激后其自身的防御機制被誘導的現(xiàn)象。SAR在植物防御病原菌的過程中起著非常重要的作用。利用可誘導SAIl的化學物質(zhì)和對其響應的啟動子構建化學誘導系統(tǒng)具有重要

2、的研究價值和廣闊的市場前景。烯丙異噻唑(Probenazole，PBZ)是目前日本殺菌劑中產(chǎn)量最大的品種之一，主要用于水稻稻瘟病的防治。PBZ可誘導擬南芥和煙草等雙子葉植物產(chǎn)生系統(tǒng)獲得抗性。在水稻中，PBZ可誘導PBZl和RPRl等基因的表達。RPRl基因產(chǎn)物包括一個核苷酸結合位點(nucleotidebindingsite，NBS)和富含亮氨酸的重復區(qū)域(1eucinerichrepeat。IRK)，因此RPR]基因與大多數(shù)植物抗病基

3、因一樣，屬于NBSLRR基因家族。本研究用5刪除的方法克隆了RPRl基因五個不同長度的啟動子片段(2416bp、1574bp、819bp、568bp和208bp)，分別與GUS基因融合后轉(zhuǎn)化擬南4芥或水稻愈傷組織。通過GUS組織化學染色，定性檢測了RPRl基因各啟動子片段在水稻愈傷組織中的PBZ誘導瞬時表達以及2416bp和1574bp片段在擬南芥中的PBZ誘導穩(wěn)定表達。研究結果表明，除208bp片段外，其余各片段在水稻愈傷組織中均可響