雷帕霉素干預(yù)TRALI大鼠肺組織病理與mTOR信號通路研究.pdf

1、目的:
　　應(yīng)用輸血相關(guān)急性肺損傷（TRALI）SD大鼠模型，明確TRALI大鼠肺組織的mTOR信號通路活化情況，研究雷帕霉素干預(yù)TRALI大鼠臨床表現(xiàn)、肺組織病理及肺組織mTOR信號通路下游蛋白p70s6k/p-p70s6k表達的影響作用[23]。
　　方法:
　　第一部分：雷帕霉素干預(yù)TRALI大鼠臨床表現(xiàn)與肺組織病理研究
　　SD大鼠30只隨機平均分成TRALI組、雷帕霉素干預(yù)（Rapa）組及對照組。TRA

2、LI組大鼠腹腔注射脂多糖（2mg/kg）1h后，靜脈抽除1ml大鼠全血并靜脈輸注人 AB型血漿（1ml/只）[23]；Rapa組大鼠預(yù)先連續(xù)三天灌胃雷帕霉素（10mg/kg），余步驟方法同 TRALI組[23]；對照組大鼠除腹腔注射及靜脈輸注等體積生理鹽水外，余步驟方法同TRALI組[23]。
　　觀察各組大鼠的臨床表現(xiàn)，應(yīng)用HE染色觀察各組大鼠肺組織病理改變情況，并通過肺組織病理評分標(biāo)準(zhǔn)對各組大鼠進行綜合評分[23]。
　

3、　第二部分：雷帕霉素干預(yù) TRALI大鼠肺組織 mTOR信號通路下游蛋白p70s6k/p-p70s6k表達變化研究
　　TRALI組、Rapa組及對照組動物模型建立同第一部分。
　　制備TRALI組、Rapa組及對照組大鼠肺組織蛋白勻漿，應(yīng)用蛋白印跡法檢測各組大鼠肺組織的mTOR信號通路下游蛋白p70s6k以及其磷酸化蛋白p-p70s6k表達情況[23]。
　　結(jié)果:
　　第一部分：雷帕霉素干預(yù)TRALI大鼠臨床

4、表現(xiàn)與肺組織病理研究
　　TRALI大鼠輸注人AB型血漿后主要出現(xiàn)呼吸急促、啰音及稀水樣便等表現(xiàn)，癥狀出現(xiàn)率均較對照組明顯增加（p<0.05）[23]；而Rapa組大鼠癥狀出現(xiàn)率與TRALI組比較則無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（p>0.05）[23]；Rapa組大鼠與對照組大鼠相比呼吸急促癥狀出現(xiàn)率增加（p<0.05），余癥狀出現(xiàn)率兩組無明顯差異（p>0.05）[23]。
　　TRALI組大鼠肺組織病理呈現(xiàn)明顯的急性肺損傷病理表現(xiàn)，其肺

5、組織病理綜合評分（9.30±2.21）較對照組（2.60±1.82）明顯增高（t=5.83，p<0.001）[23]；Rapa組肺組織病理變化較TRALI組有所緩解，其病理綜合評分（6.60±1.78）較TRALI組降低（t=-4.08，p<0.01）[23]；但Rapa組肺組織病理變化與對照組比較仍存在差異，病理綜合評分仍高于對照組（t=3.01，p<0.01）[23]。
　　第二部分：雷帕霉素干預(yù) TRALI大鼠肺組織 mTO

6、R信號通路下游蛋白p70s6k/p-p70s6k表達變化研究
　　TRALI組、Rapa組及對照組肺組織p70s6k總蛋白表達三組大鼠分別相互比較均無統(tǒng)計學(xué)差異（p>0.05）[23]。TRALI組大鼠肺組織的磷酸化蛋白p-p70s6k表達較對照組明顯增高（t=-7.22，p<0.001）[23]，而Rapa組的p-p70s6k表達比TRALI組大鼠顯著降低（t=-31.50，p<0.001）[23]，同時較對照組也明顯低下（t=