二氮嗪對幼齡大鼠深低溫低流量腦損傷的影響及機(jī)制研究.pdf

1、【目的】 通過建立幼齡大鼠深低溫低流量(DHLF)腦損傷模型，研究二氮嗪通過線粒體凋亡通路的腦保護(hù)機(jī)制。 　　【方法】 將198只3周齡SD大鼠隨機(jī)分為三組：假手術(shù)組、模型組和二氮嗪組。模型組和二氮嗪組在大鼠肛溫降至(21±0.5)℃時(shí)阻斷兩側(cè)頸總動脈120min后再開放。假手術(shù)組除不阻斷兩側(cè)頸總動脈外，其余操作相同。利用激光多普勒血流監(jiān)測儀連續(xù)監(jiān)測假手術(shù)組、模型組和二氮嗪組(每組6只)大鼠局部腦血流量。然后，每

2、組60只大鼠再隨機(jī)分成5個(gè)亞組：再灌注后1h，6h，24h，72h和7 d(n=12)。二氮嗪組于缺血前30min腹腔內(nèi)注射二氮嗪5mg/kg(溶解于0.25ml二甲基亞砜(DMSO))，模型組和假手術(shù)組則予腹腔內(nèi)注射等體積的DMSO。TUNEL法檢測各組腦組織細(xì)胞凋亡，RT-PCR檢測各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞色素c和Caspase-3的mRNA表達(dá)的變化，免疫組織化學(xué)檢測各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞色素C和caspase一3的蛋白表達(dá)的變化。 　　【結(jié)果

3、】 大鼠局部腦血流量在模型組和二氮嗪組均顯著下降。模型組和二氮嗪組在DHLF 0-5min內(nèi)分別降至正常水平的(15.73±3.47)％和(14.74±3.60)％，且在DHLF期間無明顯改變。模型組中TUNEL-陽性細(xì)胞在再灌注后6h，24h，72h和7d均顯著增高(P<0.01)，細(xì)胞色素C和Caspase-3的mRNA表達(dá)在再灌注后6h，24h和72h亦明顯增高(P<0.05 or P<0.01)，同時(shí)細(xì)胞色素C和Casp

4、ase-3的蛋白表達(dá)分別在再灌注后6h-72h和24h-72h增高(P<0.05 orP<0.01)。二氮嗪組TUNEL陽性細(xì)胞顯著下降，并且明顯抑制了細(xì)胞色素C的釋放和Caspase-3的活化(P<0.05 or P<0.01)?！　?[結(jié)論] 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明幼齡大鼠深低溫低流量模型可近似于臨床心臟手術(shù)深低溫低流量過程。二氮嗪在深低溫低流量腦缺血損傷中通過阻止細(xì)胞色素C的釋放和抑制Caspase-3的活化發(fā)揮抗細(xì)胞凋亡