薯蕷有效組分MPD治療冠心病的基礎(chǔ)研究.pdf

1、從薯蕷科植物黃山藥(DioscoreapanthaicaPrainetBurkill)或者穿山龍(D.nipponica)根莖中提取的薯蕷總皂苷，臨床廣泛應(yīng)用于治療冠心病心絞痛、心肌梗塞，療效顯著，是中藥現(xiàn)代化成功的典范之一。但其制劑較粗，是含有多種成分的有效組分，且有溶血作用，不能制成注射劑而發(fā)揮速效、強(qiáng)效作用。為適應(yīng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的需要，提高臨床療效及安全性，與國際接軌，利于中醫(yī)藥走向世界，有必要進(jìn)行深入研究。MPD由薯蕷皂苷精制而成

2、，去除其溶血和有害成分，水溶性好，無溶血作用，可制成速效、強(qiáng)效、安全的注射劑，而有利于搶救危重患者。急性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示該藥物毒性極小。藥理試驗(yàn)結(jié)果顯示，MPD有明顯的抗心肌缺血作用。在此基礎(chǔ)上，我們對MPD抗心肌缺血作用的療效和作用機(jī)制進(jìn)行了進(jìn)一步的研究，以期為臨床提供更安全、有效、質(zhì)量可控的急救藥物。 本文研究了MPD對大鼠急性心肌缺血的影響，采用大鼠冠狀動(dòng)脈結(jié)扎急性心肌梗塞模型，以ECG、心肌梗死面積、血清CK、LDH和

3、SOD、MDA、NO為指標(biāo)，考察MPD對實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血的治療作用。大鼠共分模型組、合貝爽組(1mg/kg)、MPD口服組(MPD40mg/kg)和MPDiv三個(gè)劑量組(MPD44、22、11mg/kg)共6組，每組10只。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各組結(jié)扎冠脈后心電圖均可見ST段明顯抬高；模型對照組心肌梗塞范圍分別占全心和心室的47.21±4.57、56.80±7.13(％)，表明造模成功；MPDiv高、中、低劑量組分別占全心和心室36.76±

4、7.83、37.29±8.06、40.29±6.55和44.96±10.75、45.23±10.77、47.70±8.19(％)，MPD口服組分別占全心和心室40.32±8.87和48.30±10.35，與模型對照組比較均有顯著性差異。靜脈給藥優(yōu)于灌胃給藥；MPD各組及陽性藥對照組CK和LDH水平均下降，與模型對照組比較，均有顯著性差異；且靜脈給藥組降低CK水平作用優(yōu)于口服組；與模型對照組相比，MPD高、中劑量組SOD水平升高，高劑量組

5、和口服組MDA水平降低，高劑量組NO水平升高，陽性組可升高SOD、NO水平并降低MDA水平，均有顯著性差異；其它劑量組也有相同趨勢?！　【C上所述，MPD可顯著降低大鼠心肌梗塞面積，降低心肌酶水平，提高清除氧自由基能力，同時(shí)還可改善血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能，且靜脈給藥優(yōu)于口服給藥。 本文研究了MPD對犬心肌梗塞及冠脈血流量和相關(guān)血液生化指標(biāo)的影響，雜種犬共分模型組、合貝爽組(0.5mg/kg)和MPDiv三個(gè)劑量組(MPD7、3.5、

6、1.75mg/kg)5組，每組5只。開胸后結(jié)扎犬左冠狀動(dòng)脈中下1/3處，造成急性心肌梗塞模型。觀察指標(biāo)：心外膜電圖∑-ST、N-ST、心肌梗塞范圍、冠脈血流量、血清CK和LDH、血漿6-Keto-PGF1α、TXB2和ET?！　?shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，MPD各劑量組均有減輕心肌缺血程度(∑-ST)的作用，且7mg/kg劑量組優(yōu)于其它兩個(gè)劑量組。MPD7mg/kg劑量組動(dòng)物藥前∑-ST為396.60±27.73mv，藥后15min即發(fā)揮作用，15

7、imn～180min，心肌缺血程度逐漸下降，180min時(shí)∑-ST為215.20±64.75mv，為藥前的53.98±14.25％，與模型對照組比較差異顯著(P＜0.01)；3.5mg/kg和1.75mg/kg劑量組動(dòng)物∑-ST也分別從給藥后15min起開始逐漸下降，藥物作用隨給藥時(shí)間的延長而增加，180min時(shí)，動(dòng)物∑-ST分別由藥前377.00±3.7mv和422.20±45.06mv降至245.60±41.65mv和304.20±

8、50.56mv，與模型對照組比較均差異顯著(P＜0.01)；MPD7mg/kg劑量組有明顯減小心肌缺血范圍(N-ST)的作用，藥后120min、180min，N-ST分別由藥前29.80±0.45個(gè)標(biāo)測點(diǎn)，降至25.00±2.35和23.60±3.13個(gè)標(biāo)測點(diǎn)，分別占藥前的83.86±7.33％和79.15±9.98％，與模型對照組相比有明顯差異(P＜0.01)；以定量組織學(xué)N-BT染色法顯示心肌梗塞范圍，模型組動(dòng)物心肌梗塞區(qū)分別占心臟

9、及心室的24.95±5.22％和27.46±5.08％；MPD三個(gè)劑量組均可減少動(dòng)物心肌梗塞區(qū)面積，其中7mg/kg組心肌梗塞區(qū)面積分別占心臟及心室的13.43±0.41％和14.42±0.59％，3.5mg/kg組心肌梗塞區(qū)面積分別占心臟及心室的18.00±3.69％和19.75±4.00％，與模型對照組比較均有顯著性差異(P＜0.001和P＜0.05)。合貝爽注射劑組梗塞區(qū)占心臟及占心室的百分比亦有顯著縮?。缓县愃蚆PD高、中劑量

10、藥后均有顯著增加缺血心臟冠脈血流量的作用，其中MPD7mg/kg和3.5mg/kg劑量組藥后30～180min冠脈血流量均有增加，與模型組比較，有顯著性差異(P＜0.05)；結(jié)扎冠脈形成急性心肌缺血后，模型組CK、LDH隨著冠脈結(jié)扎時(shí)間的延長逐漸增加；合貝爽和MPD能明顯抑制心肌缺血引起的CK、LDH升高，與模型對照組比較有顯著性差異(P＜0.05)；持續(xù)結(jié)扎犬冠狀動(dòng)脈過程中，模型對照組動(dòng)物血漿內(nèi)皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)含量

11、明顯升高；6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a)及6-酮-前列腺素/血栓素B2比值明顯下降。合貝爽和MPD對心肌缺血引起的血漿血栓素B2(TXB2)升高有明顯抑制作用，同時(shí)可明顯升高6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a)及6-酮-前列腺素/血栓素B2的比值。實(shí)驗(yàn)三、MPD對犬心臟血流動(dòng)力學(xué)的影響雜種犬共分空白組、合貝爽組(0.5mg/kg)和MPDiv三個(gè)劑量組(MPD7、3.5、1.75mg/kg)5組，每組5只。觀察指標(biāo)

12、：心電圖、動(dòng)脈血壓、冠脈流量、心輸出量、左室內(nèi)壓、dp/dtmax、心肌張力、心搏出量、冠脈阻力、總外周阻力、左室作功及總外周阻力?！　?shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，空白對照組和MPD各劑量組給藥前后動(dòng)脈血壓、心率及心電圖均無明顯變化；合貝爽注射劑藥后有明顯降低血壓和減慢心率的作用。藥后動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)碾妶DPR間期、QRS間期、QT間期及T波等參數(shù)均無明顯變化；MPD高、中劑量組藥后冠脈血流量增加和冠脈阻力降低都較為明顯，并且作用可持續(xù)較長時(shí)間，幅度在

13、15％左右，而低劑量組作用不明顯；合貝爽注射劑和MPD各劑量組藥后動(dòng)物心肌張力均有不同程度增加；而各給藥組左室作功未見明顯變化；MPD三個(gè)劑量組藥后左室內(nèi)壓、左室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)與對照組比較均無顯著性差異；MPD組藥后，心輸出量和心搏出量逐漸增加，且作用時(shí)間較持久；同時(shí)可降低外周阻力；合貝爽注射劑也可明顯增加心搏出量，減少外周阻力?！　”疚难芯苛薓PD對家兔血小板聚集的影響，健康雄性日本大耳白兔分5組：對照組(鹽水

14、)、來比林組(來比林90mg/kg)、MPD高劑量組(MPD20mg/kg)、MPD中劑量組(MPD10mg/kg)、MPD低劑量組(MPD5rog/kg)。給藥三天后以ADP、膠原、花生四烯酸為誘導(dǎo)劑測定各組血小板聚集率，以給藥前后聚集率差值進(jìn)行組間比較，結(jié)果顯示，和空白組相比，MPD各組的藥后聚集率以及給藥前后的差值均沒有顯著性差異；來比林組對AA誘導(dǎo)的血小板聚集的藥后值以及給藥前后的差值均有顯著性差異。提示MPD的抗心肌缺血作用不

15、是因?yàn)槠淇寡“寰奂饔谩?本文研究了MPD對大鼠體內(nèi)外血栓形成及血液粘度的影響，將健康雄性SD大鼠分5組：每組10只：對照組(生理鹽水)、來比林組(來比林90mg/kg)、MPD高劑量組(MPD22mg/kg)、MPD中劑量組(MPD11mg/kg)和MPD低劑量組(MPD5.5mg/kg)。電凝法觀察MPD對大鼠體內(nèi)血栓形成的影響；Chandler體外法觀察MPD對大鼠體外血栓形成的影響；用血液粘度測定儀測定全血粘度和血漿粘

16、度。結(jié)果顯示，來比林組和MPD中劑量組可降低大鼠體內(nèi)血栓形成時(shí)間(OT值)，高、低劑量組也有相同趨勢；MPD高劑量組可降低大鼠體外血栓長度、濕重和干重，來比林組可降低血栓濕重和干重；MPD高、中、低劑量組和來比林組均可降低。 結(jié)論：MPD可降低大鼠和犬急性心肌梗塞模型的心肌梗塞面積和心肌酶的水平、減輕心肌缺血程度，升高模型大鼠SOD和NO的水平、降低MDA的水平，增加缺血心臟冠脈血流量，明顯抑制缺血引起的血漿血栓素B2(TXB2

17、)升高、升高6-酮-前列腺素(6-Keto-PGFla)及6-酮-前列腺素/血栓素B2的比值。且靜脈給藥優(yōu)于口服給藥；MPD可增加正常麻醉犬的冠脈流量和心輸出量，增加心肌張力，同時(shí)降低冠脈阻力和總外周阻力；而對血壓、心率、心電圖、左室內(nèi)壓、左室內(nèi)壓最大上升速率沒有明顯影響；MPD對家兔血小板聚集沒有明顯影響；MPD可抑制大鼠體內(nèi)外血栓形成，并可降低高、中、低切全血粘度和血漿粘度；MPD小鼠腹腔注射的LD50相當(dāng)于臨床擬用量的585倍，顯