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1、丙酮酸和乙酸是人體內(nèi)廣泛存在的有機(jī)酸,它們對(duì)血管有無舒張作用,迄今未見文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過記錄離體大鼠主動(dòng)脈環(huán)張力對(duì)丙酮酸、乙酸引起血管的舒張作用以及它們與SO2的聯(lián)合作用進(jìn)行了初步研究。細(xì)胞內(nèi)游離Ca+濃度是決定血管平滑肌收縮、舒張的關(guān)鍵因素,影響細(xì)胞內(nèi)Ca2+的分布必然影響血管平滑肌的收縮與舒張。本室前期研究表明,SO2及其衍生物可引起大鼠血壓降低,血管舒張,并且已證實(shí)SO2衍生物可以降低血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度,由此推斷S
2、O2可使血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度降低。本實(shí)驗(yàn)利用激光共聚焦顯微鏡測(cè)定培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度來證明上述推斷。
①丙酮酸和乙酸對(duì)血管的舒張作用及與SO2的聯(lián)合作用
將離體大鼠主動(dòng)脈環(huán)灌流,應(yīng)用去甲腎上腺素預(yù)收縮主動(dòng)脈環(huán)后,觀察丙酮酸和乙酸引起主動(dòng)脈環(huán)的舒張反應(yīng)以及SO2(10μmol·L-1、100μmol·L-1)、硝普鈉(5nmol·L-1)、SO2衍生物(10μmol·L-1、100μmol·L-1
3、)分別和丙酮酸、乙酸同時(shí)作用引起主動(dòng)脈環(huán)的舒張反應(yīng)。結(jié)果表明:丙酮酸和乙酸對(duì)大鼠離體主動(dòng)脈環(huán)有舒張作用,并且這種舒張作用是呈濃度(丙酮酸0.5、1、5、10、20、50、100、500、1000mmol·L-1;乙酸0.5、1、5、10、50、100mmol·L-1)依賴性的。SO2、SNP、SO2衍生物分別和丙酮酸、乙酸同時(shí)作用,均可不同程度使血管的舒張作用增強(qiáng)。由此得出結(jié)論:內(nèi)源性丙酮酸和乙酸均可對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)有劑量依賴性的舒
4、張作用。SO2、SNP、SO2衍生物可不同程度增強(qiáng)血管的這種舒張作用。
②SO2對(duì)血管平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生Ca2+濃度的影響
選用第3代熒光指示劑Fluo-3,利用激光掃描共聚焦技術(shù)測(cè)定培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度變化。細(xì)胞內(nèi)加入不同濃度SO2和SNP,另外我們還觀察了非選擇性K+通道阻斷劑四乙胺(20mmol·L-1)、L-型鈣離子通道阻斷劑硝苯地平(1μmol·L-1)對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的影響。結(jié)果顯示:S
5、O2不僅可使培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度降低,而且可促進(jìn)SNP濃度依賴性降低Ca+濃度的作用。四乙胺對(duì)濃度較低SO2(300μmol·L-1)和濃度較高SO2(1000μmol·L-1)引起[Ca2+]i下降的作用均有抑制作用。硝苯地平對(duì)濃度較低SO2(300μmol·L-1)引起[Ca2+]i下降的作用無明顯影響,而對(duì)濃度較高SO2(1000μmol·L-1)引起[Ca2+]i下降的作用有抑制作用。由此得出結(jié)論:SO2對(duì)外鈣
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