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文檔簡介
1、江南大學碩士學位論文甘油合成關鍵酶基因CgGPD1在大腸桿菌和產甘油假絲酵母中的表達姓名：王震申請學位級別：碩士專業(yè)：微生物學指導教師：饒志明沈微20080801AbstractAbstractGlycerolisallimportantmaterialforthelightandchemicalindustriesNowitiswidelyusedinthecosmetic，toothpaste，tobacco，essence，pri
2、ntingdyeing，textile，paint，leatherpapersyntheticresin，pharmaceutical，foodanddefenseindustriesandasafeedstockfortheproductionofvariouschemicalsCompared謝t11thetraditionalmethods，thezymotechnicshasitsownadventageinthesynthes
3、isofglycer01CandidaglycerinogenesWL20025isaexcellentstrainforglycerolproductionanditsintellectualpropertyrightsbelongstoourlab，theyeasthasseveralusefulproperties，suchastolerancetohighglucoseconcentrations，rapidgrowthanda
4、bilitytoaccumulatehighextracellularglycerolconcentrationIthasbeenappliedtotheglycerolindustrialThestudyshowsthatglycerol3phosphatedehydrogenaseisthekeyenzymeofglyceolsynthesis，themostdirectwaytoincreasetheglycerolproduct
5、ionistooverexpressthegeneofGPDH—GPDIThegeneofglycerol一3一phosphatedehydrogenaseCgGPDlfromCandidaglycerinogeneswasclonedusingPCRonthebaseofpreviousresearch，andconstructedbinaryvectorwithdifferentcopiesofCgGPDI：pCAM3300zeoc
6、inCgGPDl、pCAM3300zeocinCgGPDlCgGPDlandpCAM3300zeocinCgGPDl一CgGPDl一CgGPDlThevectorsweretransformedinEscherichiacoliJM109respectivelyTheexpressionofGPDHofthetransformantscontainingdifferentcopiesofCgGPDIunderdifferentconce
7、ntrationofNaClandglucosewereresearchedTheefficiencyofthegeneralwaytotransformtheCandidaglycerinogenesisverylowbecauseCandidaglycerinogenesisaindustrialstrain，itscellwallistypicalUsingthewayofAgrobacteriumtumefaciensmedia
8、tedtransformation，thetranformants誠tllonecopyCgGPDlwerescreenedandnorminatedCandidaglycerinogenes—CgGPDl(CgG)ThetransformantwithhiIghglycerolproductionwerescreenedandnorminatedCgG8，theexperimentsshowthattheinsertofthegene
9、CgGPDIdidn’tchangethegrowthofCgG8，therateofglucoseconsumptionofCgG8isfasterthanCg；theglycerolproductionofCgG8is1208％higherthanCg；andalso，thefermentaiontimeofCgG8is6hoursshorterthanCg；therateofglycerolsynthesisofCgG8is204
10、9％quickerthanCgDuringthefermentationtheactivityofglycerol3一phosphatedehydrogenaseofCgG8maintainsahighlevelastheCg，，butitishigherthanCg，itindicatesthatthegeneCgGPDlistransferedintoCglycerinogenesandexpressedsuccessfullyKe
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