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1、目的:乙酰肝素酶(heparanase,HPA)是一種能降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparansulphate proteoglycan,HSPG)的β內(nèi)源性葡萄糖醛酸酶,能促進(jìn)腫瘤血管形成,與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),本研究將探討乙酰肝素酶被沉默后對(duì)人胃癌在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)、血管形成和轉(zhuǎn)移的影響。
方法:利用人胃癌SGC-7901細(xì)胞和HPA被沉默的人胃癌SGC-7901細(xì)胞(SGC-7901-HPA(-))分別建立6只裸
2、鼠皮下移植瘤,檢測(cè)其成瘤的時(shí)間、生長(zhǎng)體積和生長(zhǎng)速度。利用RT-PCR和Westernblot方法檢測(cè)兩組皮下移植瘤中HPAmRNA和HPA蛋白表達(dá)情況,利用免疫組織化學(xué)方法來(lái)檢測(cè)兩組皮下移植瘤組織的微血管密度(MVD)。將兩組皮下移植瘤組織分別注射入6只裸鼠腹腔建立腹腔轉(zhuǎn)移瘤模型,觀察裸鼠腹腔轉(zhuǎn)移瘤的生長(zhǎng)情況。
結(jié)果:1、由人胃癌SGC-7901細(xì)胞和人胃癌SGC-7901-HPA(-)細(xì)胞建立的裸鼠皮下移植瘤均成瘤,分別
3、在4天后和8天后出現(xiàn)腫瘤,第25天體積分別為(924±117.6)mm3和(486.3±117.5)mm3(P<0.05),MVD分別為(20.69±1.20)和(11.35±1.94)(P<0.01);由人胃癌SGC-7901-HPA(-)建立的裸鼠皮下移植瘤的HPAmRNA表達(dá)和HPA蛋白表達(dá)均下降。2、由人胃癌SGC-7901細(xì)胞引起的移植瘤建立的腹腔轉(zhuǎn)移瘤,腹腔發(fā)現(xiàn)有四處轉(zhuǎn)移病灶,在肝臟、右腎、大網(wǎng)膜和腸部位,瘤體較大。由人胃癌
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