Dll4-Notch信號途徑對胃癌生物學行為的影響及機制研究.pdf

1、浙江大學博士學位論文Dll4Notch信號途徑對胃癌生物學行為的影響及機制研究姓名：李國剛申請學位級別：博士專業(yè)：外科學(普外)指導教師：陳力20120529浙江大學博士學位論文摘要增殖，分化與凋亡等生物學行為。Dll4作為Notch信號途徑的五個配體之一，對血管生成發(fā)揮著決定性的調節(jié)作用。近年來的研究表明Notch信號途徑不僅調控血管生成，也對腫瘤的進展發(fā)揮著重要作用，因而被認為是一個潛在的治療靶點。有趣的是，Notch信號途徑在不同

2、的實體瘤中可能起著截然不同的生物學作用。在胰腺癌，結腸癌、乳腺癌等大多數實體瘤中表現為致癌作用，而在部分皮膚癌，肺癌及前列腺癌中表現為抑癌作用。與其他實體瘤相比，Notch信號途徑在胃癌惡性生物學行為中的作用及其機制的相關研究報道較少。在本實驗中，我們首先利用實時熒光定量PCR、w色st鋤blott她及免疫熒光技術研究Dll州otCh信號通路相關基因及蛋白在胃癌細胞系表達情況，并利用免疫組化方法檢測30例臨床胃癌標本中DIl4蛋白表達情

3、況及其分布，發(fā)現Dll4及Notchl胞內段NIcD在5株胃癌細胞系中均有陽性表達，Dll4蛋白在胃癌組織中的表達陽性率明顯高于癌旁及正常胃粘膜組織；隨后，進一步在體外培養(yǎng)胃癌細胞系中研究了DIl州otch異常激活對胃癌增殖、侵襲、遷移及化療藥物敏感性等生物學行為的影響，并在荷瘤BALB／C雄性小鼠體內研究了Dll4／Notch異常激活對胃癌生長的影響。另外，我們初步研究了丫分泌酶抑制劑D。6胛對體外培養(yǎng)的胃癌細胞增殖的影響。2實驗方法

4、21Dll4及其主要受體NotChl在胃癌細胞系中的表達：利用RealTiIncPCR、w，estemblotting與免疫熒光在mRNA與蛋白水平檢測Dll4及Notchl受體活性胞內段NICD在胃癌細胞系中的表達水平。22Dll4在臨床胃癌標本中的表達及其分布：利用免疫組化方法檢測Dll4在30例臨床胃癌組織、癌旁及正常胃粘膜組織中的表達及分布。23構建pEGFPC1Dll4過表達載體并建立過表達D114穩(wěn)轉胃癌細胞系：為研究Dll