耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌的分子特征.pdf

1、目的：了解鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的主要耐藥機(jī)制，以及其在醫(yī)院分布流行的特點(diǎn)。
　　 方法：首先用Whonet軟件從實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)庫中分析篩選臨床分離的耐碳青霉烯的鮑曼不動(dòng)桿菌(CRAB)，在此基礎(chǔ)上，使用多重PCR基因擴(kuò)增，檢測(cè)所有篩選出的CRAB的碳青霉烯酶(包括金屬酶和苯唑西林酶)基因，I類和II類整合子基因和插入序列基因(ISAba-l)，對(duì)部分blaOXA-23-like擴(kuò)增陽性基因進(jìn)行測(cè)序分析；從所有篩選出的C

2、RAB中挑選來自外科重癥監(jiān)護(hù)室的菌株，使用瓊脂稀釋法測(cè)定各菌株對(duì)13種抗生素的MIC值，用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)進(jìn)行基因型檢測(cè)，并結(jié)合患者的臨床資料和菌株的基因型分布，了解CRAB在外科重癥監(jiān)護(hù)室的流行情況；結(jié)晶紫染色法檢測(cè)外科重癥監(jiān)護(hù)室的CRAB生物被膜的形成率，掃描電鏡觀察CRAB生物被膜的形態(tài)。
　　 結(jié)果：用Whonet軟件篩選出我院2007年1月-12月由臨床分離到的CRAB菌株197株；197株菌的OXA酶基因檢

3、測(cè)顯示，含有blaOXA23-like的有184株，含有blaOXA-58-like的有1株，沒有檢測(cè)出blaOXA-24-like；金屬β-內(nèi)酰胺酶基因檢測(cè)顯示，有一株菌攜帶有blaIMP，但blavIM和blaSIM-1未檢測(cè)出，整合子基因檢測(cè)顯示，含有I類整合子的有184株，未檢測(cè)出II類整合子，插入序列基因檢測(cè)顯示，有195株具有ISAba-l；從隨機(jī)抽取的3株blaOXA23-like陽性的基因擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，結(jié)果顯示和Ge

4、nbank中的EU977574.1比較，同源性達(dá)98％以上；我院外科重癥監(jiān)護(hù)室在2007年共分離出來自不同患者的CRAB40株，另有從醫(yī)護(hù)人員和病區(qū)環(huán)境中分離到的CRAB10株，這50株CRAB對(duì)10種抗生素均呈高度耐藥，只對(duì)多粘菌素類敏感率較高；通過PFGE分型發(fā)現(xiàn)，全部50株CRAB共分為4個(gè)基因型，分別命名為A、B、C、D，其中A型數(shù)量最多，是主要流行克隆株，各基因型間有一定的親緣關(guān)系；外科重癥監(jiān)護(hù)室的50株CRAB中有17株能夠

5、在體外試驗(yàn)中形成生物被膜，其中從醫(yī)護(hù)人員和病區(qū)環(huán)境中分離到的CRAB有9株。
　　 結(jié)論：我院2007年出現(xiàn)的CRAB，其主要耐藥基因?yàn)閎laOXA-23-like和blaOXA-51-like，耐藥機(jī)制為產(chǎn)生OXA-23類和OXA-51類碳青霉烯酶；對(duì)外科重癥監(jiān)護(hù)室進(jìn)行分子流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，外科重癥監(jiān)護(hù)室分離到的CRAB以A基因型為主，由于從環(huán)境中也分離到此基因型的鮑曼不動(dòng)桿菌，說明CRAB在外科重癥監(jiān)護(hù)室內(nèi)具有相同克隆傳播的