a1腎上腺素受體對(duì)NK92-MI細(xì)胞功能影響的研究.pdf

1、應(yīng)激(stress)是機(jī)體對(duì)作用于自身要求的一種非特異性應(yīng)答，涉及神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)和許多其它器官，最初是由內(nèi)分泌學(xué)家H．Selye在20世紀(jì)30年代提出，人們觀察應(yīng)激對(duì)機(jī)體免疫功能影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫功能低下，其中自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)殺傷活性也受到抑制。
　　 研究表明，交感神經(jīng)系統(tǒng)(SNS)對(duì)免疫組織具有廣泛的支配，交感神經(jīng)的主要遞質(zhì)是去甲腎上腺素(NE)，NE的作用是通過(guò)腎上腺素受體(AR)來(lái)實(shí)現(xiàn)，根據(jù)AR與其配

2、體結(jié)合特性及功能等差異，將AR主要分為α1、α2和β三大類。α1-AR分為三種亞型，即α1A-、α1B-和α1D-AR，值得重視的是，α1-AR三種亞型功能受體分布的差異，特別是它們?cè)诩?dòng)劑作用下不同的反應(yīng)和行為特點(diǎn)，可能是造成其功能差異的原因之一。
　　 在應(yīng)激時(shí)，NK細(xì)胞是否存在α1-AR各亞型的表達(dá)，NE對(duì)NK細(xì)胞的早期凋亡是否有誘導(dǎo)作用，又有何種變化，本實(shí)驗(yàn)研究不同濃度NE對(duì)α1-AR表達(dá)以及NK細(xì)胞早期凋亡的變化，進(jìn)而

3、認(rèn)識(shí)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對(duì)免疫系統(tǒng)的影響。
　　 方法:
　　 1、Real-Time PCR檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組NK92-MI細(xì)胞α1-AR亞型mRNA的表達(dá)水平，并檢測(cè)同時(shí)加入α1-AR阻斷劑哌唑嗪后各實(shí)驗(yàn)組α1-AR亞型mRNA的表達(dá)水平變化。
　　 2、CCK-8法測(cè)定不同濃度NE(1×10-12M，1×10-10M，1×10-9M，1×10-8M，1×10-6M)對(duì)NK92-MI細(xì)胞作用1h后其殺傷活性的影響。

4、>　　 3、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組NK92-MI細(xì)胞早期凋亡率，并檢測(cè)加入α1-AR阻斷劑哌唑嗪或P物質(zhì)后對(duì)NK92-MI細(xì)胞早期凋亡的影響。
　　 結(jié)果:
　　 NK92-MI細(xì)胞存在α1-AR三種亞型的表達(dá)，α1-AR阻斷劑哌唑嗪能夠阻斷NE對(duì)α1-AR各亞型表達(dá)的誘導(dǎo)作用；用終濃度為1×10-12M，1×10-10M，1×10-9M，1×10-8M，1×10-6M的NE作用NK92-MI細(xì)胞1h后，在效靶細(xì)胞比為

5、4:1時(shí)，各濃度NE對(duì)NK92-MI細(xì)胞的殺傷活性有明顯的抑制作用(P＜0.05)，加入終濃度為1×10-6Mα1-AR阻斷劑哌唑嗪能夠阻斷低濃度NE對(duì)NK92-MI細(xì)胞殺傷活性的抑制作用；NE對(duì)NK92-MI細(xì)胞早期凋亡有誘導(dǎo)作用，哌唑嗪及SP能夠阻斷1×10-8M的NE對(duì)NK92-MI細(xì)胞早期凋亡的誘導(dǎo)作用(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1、NK92-MI細(xì)胞表達(dá)α1-AR各亞型。
　　 2、應(yīng)激濃度

6、NE(1×10-8M)對(duì)NK92-MI細(xì)胞α1-AR各亞型的表達(dá)有誘導(dǎo)作用，α1-AR阻斷劑哌唑嗪可阻斷這種作用。
　　 3、效靶比為4:1時(shí)，各濃度的NE(1×10-12M，1×10-10M，1×10-9M，1×10-8M，1×106M)均能降低NK92-MI細(xì)胞殺傷活性。
　　 4、1×10-6M哌唑嗪對(duì)低濃度NE抑制NK細(xì)胞殺傷活性有阻斷作用。
　　 5、應(yīng)激濃度NE(1×10-8M)可誘導(dǎo)NK92-MI細(xì)