ELR1和E-cycT1轉(zhuǎn)基因小鼠對EIAV易感性的研究.pdf

1、病毒感染的趨向性不僅由病毒特異性受體決定，還受到宿主體內(nèi)其他生物因素的影響。病毒特異性受體及宿主體內(nèi)病毒趨向性限制因素的研究為研制抗病毒藥物和疫苗提供了重要靶向。盡管之前ELR1被鑒定為馬傳染性貧血病毒(EIAV)的受體，但是表達ELR1蛋白的小鼠NIH3T3細胞只能允許EIAV進入和整合而不能產(chǎn)生新的病毒粒子。進一步實驗表明，表達ELR1和e-cycT1的NIH3T3細胞能夠支持EIAV的復(fù)制，并能產(chǎn)生與馬源易感細胞相同的、有感染能力

2、的病毒粒子。
　　本實驗試圖探究ELR1和e-cycT1能否支持EIAV在小鼠體內(nèi)復(fù)制，是否存在其他限制因素影響EIAV的體內(nèi)復(fù)制，進而為理解慢病毒趨向性和發(fā)病機制提供新的體內(nèi)模型。
　　本實驗通過原核顯微技術(shù)構(gòu)建ELR1/e-cycT1轉(zhuǎn)基因小鼠，并使用PCR，實時熒光定量PCR，熒光原位雜交，Western blotting和免疫組化等技術(shù)檢測小鼠體內(nèi)ELR1和e-cycT1基因的表達及攻毒后EIAV的復(fù)制。實驗結(jié)果表明

3、，轉(zhuǎn)基因小鼠的腸、脾和淋巴結(jié)中可以檢測到ELR1和e-cycT1基因的mRNA和蛋白。而且，攻毒后在這些器官中可以檢測到EIAV的mRNA和蛋白。另外，轉(zhuǎn)基因小鼠外周血中EIAV基因組拷貝數(shù)隨病毒接種時間延長而升高，證實有新生病毒粒子產(chǎn)生。
　　本研究使用原核顯微注射法成功構(gòu)建了ELR1/e-cycT1轉(zhuǎn)基因小鼠。研究表明ELR1和e-cycT1基因能夠在小鼠體內(nèi)表達，并能支持EIAV在小鼠體內(nèi)復(fù)制。本實驗為ELR1是EIAV的功