帕尼單抗生物類似物對腫瘤的抑制及放療增敏作用的研究.pdf

1、目的：比較一種帕尼單抗生物類似物KN032與帕尼單抗的生物活性以及對腫瘤生長抑制作用的相似性，研究KN032的放射治療增敏作用及其機制。
　　方法：選擇EGFR高表達的表皮癌細(xì)胞株A431為研究對象，采用MTT方法檢測KN032和Panitumumab在體外對腫瘤生長的抑制作用，并比較它們對腫瘤抑制的生物學(xué)相似性；采用流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測Panitumumab和KN032與A431細(xì)胞的結(jié)合能力，比較它們的相似性；建立A431細(xì)胞裸

2、鼠荷瘤模型，隨機分為對照組、KN03220μg組、KN032200μg組、Panitumumab20μg組、Panitumumab200μg組五組，觀察兩種抗體在不同濃度時在體內(nèi)對腫瘤增殖的影響，并且比較兩種抗體抑制作用的相似性；通過克隆形成實驗分析KN032對A431細(xì)胞的放療增敏作用，設(shè)單純照射、KN032+照射組、Panitumumab+照射組3組，采用免疫熒光方法檢測不同實驗組細(xì)胞中γH2AX的表達。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果

3、顯示KN032和Panitumumab對A431細(xì)胞均有抑制作用，在4μg/mL的濃度范圍內(nèi)，隨著藥物濃度的增加，抗體對細(xì)胞的抑制效果增強，并且在各個相同的濃度下，KN032和Panitumumab對細(xì)胞的抑制作用相似；流式細(xì)胞學(xué)實驗結(jié)果顯示KN032與A431細(xì)胞的結(jié)合能力與Panitumumab相似，KN032的EC50=0.21，Panitumumab的EC50=0.23；體內(nèi)實驗顯示，KN032和Panitumumab對小鼠腫瘤

4、生長均有抑制作用，并且當(dāng)劑量為200μg時，抗體對腫瘤生長的抑制作用強于20μg劑量時，并且在相同劑量時兩者對小鼠腫瘤生長抑制作用相似；細(xì)胞克隆形成實驗顯示，KN032和Panitumumab對A431細(xì)胞均具有放療增敏作用，并且兩種抗體的放療增敏作用效果相似；免疫熒光實驗顯示，KN032和Panitumumab可以增加X射線照射后0.5和4h時的A431細(xì)胞核內(nèi)γH2AX的表達量（P<0.05），在射線照射后12h時，三組細(xì)胞核內(nèi)γH