細(xì)胞色素P11B-,1-、細(xì)胞色素P11B-,2-及促腎上腺皮質(zhì)激素受體與腎上腺腫瘤.pdf

1、目的：
　　 檢測(cè)細(xì)胞色素P11B1（CYP11B1）、細(xì)胞色素P1182（CYP1182）及促腎上腺皮質(zhì)激素受體（ACTH-R）在正常腎上腺皮質(zhì)、醛固酮分泌腺瘤、皮質(zhì)醇分泌腺瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤中的表達(dá)水平，初步探索此三種基因與上述腎上腺皮髓質(zhì)腫瘤疾病的關(guān)系。
　　 方法：
　　 1.用Trizol試劑分別提取組織的總RNA，包括：正常腎上腺組織（n=6）、嗜鉻細(xì)胞瘤（n=2）、醛固酮分泌腺瘤（n=18）、皮質(zhì)醇分泌

2、腺瘤（n=11）。
　　 2.逆轉(zhuǎn)錄后擴(kuò)增CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R和內(nèi)參GAPDH的cDNA，產(chǎn)物電泳后測(cè)條帶灰度，計(jì)算CYP11B1/GAPDH、CYP11B2/GAPDH和ACTH-R/GAPDH灰度的比值代表以上基因的相對(duì)表達(dá)量。
　　 3.分別比較CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因在不同腎上腺組織中的表達(dá)差異：分別分析CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因的表達(dá)與腫瘤激

3、素分泌水平等臨床指標(biāo)的關(guān)系；分析上述三種基因表達(dá)相互之間的聯(lián)系。
　　 結(jié)果：
　　 1.在正常腎上腺皮質(zhì)、醛固酮分泌腺瘤和皮質(zhì)醇分泌腺瘤中均存在不同程度的CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R基因的表達(dá)，在嗜鉻細(xì)胞瘤中未發(fā)現(xiàn)以上三種基因的表達(dá)。
　　 2.醛固酮分泌腺瘤與CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R：
　　 1）CYP11B1、CYP1182和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表達(dá)：

4、CYP11B1在醛固酮分泌腺瘤中的表達(dá)（0.65±0.34）低于正常腎上腺組織（0.72±0.13，P<0.01）和皮質(zhì)醇分泌腺瘤（0.99±0.50，P<0.01）。CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤中的表達(dá)（1.55±0.43）高于正常腎上腺組織（1.25±0.75，P<0.01）和皮質(zhì)醇分泌腺瘤（1.24±0.52，P<0.01）。ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表達(dá)（0.62±0.27）低于正常腎上腺組織（0.98±0.36，P<0

5、.01）和皮質(zhì)醇分泌腺瘤（0.87±0.28，P<0.01）。
　　 2）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R與醛固酮分泌腺瘤患者臨床資料的相關(guān)性：醛固酮分泌腺瘤中CYP11B1 mRNA的水平與患者血鉀血鈉水平、臥立位腎素活性、血管緊張素和醛固酮的水平及24h UFC無(wú)相關(guān)。ACTH-R表達(dá)陽(yáng)性的醛固酮分泌瘤CYP11Bx mRNA的水平與24h UFC無(wú)相關(guān)。
　　 醛固酮分泌腺瘤伴低血鉀的患者（n=8）CY

6、P11B2 mRNA水平與患者血鉀水平負(fù)相關(guān)（r-0.718，p=0.04），與立位醛固酮水平正相關(guān)（r=0.708，p=0.045），與其他臨床指標(biāo)無(wú)相關(guān)性。在血鉀正常醛固酮分泌腺瘤中的患者中（n=10），CYP11B2mRNA水平與以上臨床指標(biāo)無(wú)相關(guān)性。
　　 對(duì)腎素有反應(yīng)的醛固酮分泌腺瘤患者（n=3）ACTH-R表達(dá)的平均水平為0.54±0.14，明顯低于無(wú)反應(yīng)的醛固酮分泌腺瘤患者（n=15）（0.64±0.25 P<0.

7、01）。ACTH-R表達(dá)陽(yáng)性的患者（n=11）醛固酮分泌腺瘤ACTH-R mRNA的水平與患者立位醛固酮水平正相關(guān)（r=0.845，P<0.01），與患者血鈉血鉀水平、臥立位腎素活性、血管緊張素、及24h UFC水平無(wú)明顯相關(guān)性。
　　 3）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中表達(dá)的相關(guān)性：CYP11B2和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表達(dá)呈正相關(guān)。（r：0.662，p<0.01）。CYP11B2和A

8、CTH-R在ACTH-R表達(dá)陽(yáng)性的醛固酮分泌腺瘤中的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.765，P<0.01）。
　　 3.皮質(zhì)醇分泌腺瘤與CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R：
　　 1）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R在皮質(zhì)醇分泌腺瘤中的表達(dá)：CYP11B1在皮質(zhì)醇分泌腺瘤中的表達(dá)（0.99±0.50）高于正常腎上腺組織（0.72±0.13，P<0.01）和醛固酮分泌腺瘤（0.65±0.34，P<0.01）。C

9、YP11B2在皮質(zhì)醇分泌腺瘤中的表達(dá)（1.24±0.52）低于正常腎上腺組織（1.25±0.75，P=0.01）和醛固酮分泌腺瘤（1.55±0.43，P<0.01）。ACTH-R在皮質(zhì)醇分泌腺瘤中的表達(dá)（0.87±0.28）低于正常腎上腺組織（0.98±0.36，P<0.01）但高于醛固酮分泌腺瘤（0.62±0.27，P<0.01）。
　　 2）CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R與皮質(zhì)醇分泌腺瘤患者臨床資料的相關(guān)性皮質(zhì)

10、醇分泌腺瘤中CYP11B1 mRNA的表達(dá)與24hUFC正相關(guān)（r=0.815，p=0.002），但與血F（r=0.537，p=0.068）及ACTH水平無(wú)明顯相關(guān)性。
　　 皮質(zhì)醇分泌腺瘤中CYP11B2 mRNA的水平與24hUFC、血F及ACTH水平無(wú)明顯相關(guān)性。
　　 皮質(zhì)醇分泌腺瘤ACTH-R mRNA水平與24hUFC水平負(fù)相關(guān)（r=-0.629，p=0.038），與血總皮質(zhì)醇含量ACTH值無(wú)明顯相關(guān)性。

11、r>　　 3）CYP11B1、CYP11B2及ACTH-R在正常腎上腺組織及皮質(zhì)醇分泌腺瘤中表達(dá)的相關(guān)性：
　　 正常組織和皮質(zhì)醇分泌腺瘤CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因表達(dá)沒(méi)有相關(guān)性。
　　 結(jié)論
　　 1.CYP11B1在皮質(zhì)醇分泌腺瘤中高表達(dá)，其表達(dá)與患者24hUFC水平正相關(guān)，提示CYP11B1在皮質(zhì)醇分泌腺瘤激素合成過(guò)程中可能存在重要的作用。
　　 2.CYP11B2在醛固酮分

12、泌腺瘤中高表達(dá)，其表達(dá)與伴低鉀的患者血鉀水平負(fù)相關(guān)，立位醛固酮水平正相關(guān)，提示CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤激素合成過(guò)程中可能存在重要的作用。
　　 3.ACTH-R在皮質(zhì)醇分泌腺瘤中表達(dá)減少，提示ACTH在皮質(zhì)醇分泌腺瘤中受到了抑制。ACTH-R在對(duì)腎素有反應(yīng)的醛固酮分泌腺瘤患者中的表達(dá)明顯低于無(wú)反應(yīng)的患者，提示ACTH可能影響醛固酮分泌腺瘤患者對(duì)RAS系統(tǒng)的反應(yīng)。醛固酮分泌腺瘤ACTH-R的表達(dá)與患者CYP1182的表達(dá)患者