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1、目的:研究脂多糖(LPS)和血小板活化因子(PAF)誘導(dǎo)急性肺損傷(ALI)機(jī)制及G蛋白偶聯(lián)受體激酶(GRKs)對(duì)其調(diào)控作用,通過觀察LPS、PAF誘導(dǎo)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(RPMVEC)損傷時(shí)單層通透系數(shù)(Kf)和F-肌動(dòng)蛋白(F-actin)的變化,以探討F-actin在RPMVEC損傷時(shí)的作用,并通過觀察GRKs的變化對(duì)Kf和F-actin的影響,以了解GRKs在炎癥誘導(dǎo)細(xì)胞損傷過程中的調(diào)控作用.結(jié)論:1成功進(jìn)行原代培養(yǎng)RPMVE
2、C,鑒定確定為RPMVEC,并觀察到LPS、PAF作用于RPMVEC可引起細(xì)胞脫落及細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變.2 LPS、PAF作用于RPMVEC可引起F-actin的解聚和單層通透性的增高.3 LPS、PAF作用RPMVEC不同時(shí)相點(diǎn)可引起細(xì)胞GRK2表達(dá)增高.4山莨菪堿可抑制LPS、PAF引起的RPMVEC單層通透性增高及PAF、1ug/ml LPS引起的RPMVEC F-actin下降,對(duì)PAF、LPS作用RPMVEC引起的GRK2表達(dá)增高
3、無影響.5小劑量PMA可抑制LPS、PAF作用RPMVEC單層通透性的增高和F-actin的下降,且可引起LPS、PAF作用RPMVEC的GRK2表達(dá)明顯增高.6燈盞花素可抑制PAF作用RPMVEC單層通透性增高和F-actin下降,并能促進(jìn)PAF作用RPMVECGRK2表達(dá)的進(jìn)一步增高,燈盞花素對(duì)10μg/ml LPS作用于RPMVEC的上述各環(huán)節(jié)無影響,卻可抑制1ug/mlLPS作用細(xì)胞引起的F-actin下降.7 RPMVEC的F
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