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文檔簡介
1、文獻報導,人的血清中有含量豐富的糖鏈天然抗體,如anti-α-Gal、anti-Rhamnose、 anti-Forssman(GalNAcα1-3GalNAcβ)、 anti-Mamnose、anti-GalNAc等。近年來,對于anti-α-Gal抗體的研究比較多,該抗體能專一性識別Galα(1-3)Galβ(1-4)GlcNAc-R糖表位。Galili.U等圍繞anti-α-gal抗體和α-Gal表位的特異結合原理,針對含有α-G
2、al表位的化合物在疾病治療方面進行一系列的實驗。例如合成α-Gal流感疫苗和α-Gal-HIV gp120疫苗,以提高疫苗的免疫原性;制備含有α-Gal表位的腫瘤細胞用于癌癥治療等。Newlink公司發(fā)明的HyperAcute(R)免疫治療技術,即利用自體或異體腫瘤細胞,通過逆轉錄病毒載體轉染α-1,3GalT,得到有α-Gal表位的腫瘤細胞,用于腫瘤患者的手術后輔助治療。因此,我們設想通過不同方法使腫瘤細胞表面連有Rhamnose,人
3、體大量的天然anti-Rhamnose抗體就會識別Rhamnose并與其結合,形成免疫復合物,一方面,抗體的Fc段與APC的FcγR結合,增強APC對腫瘤細胞的識別與吞噬,引發(fā)針對腫瘤細胞的細胞免疫反應,打破免疫耐受。另外,抗體的Fc段與血清中補體C1q結合活化補體系統,通過級聯激活反應,激活C3b,沉積在腫瘤細胞表面,隨后轉化為iC3b,促進膜攻復合物的形成,引起腫瘤細胞溶解,產生CDC效應。
第二章中我們合成了糖肽Rh
4、amnose-RGD,其中的RGD能和腫瘤表面過量表達的整合素αvβ3特異性結合,將Rhamnose攜帶至腫瘤細胞表面。該章為anti-Rhamnose抗體在腫瘤免疫治療的應用提供參考價值。
鼠李糖脂(Rhamnolipid)是由假單胞菌或伯克氏菌類產生的一種陰離子生物表面活性劑。其親水基團一般由1~2分子的鼠李糖環(huán)構成,憎水基團則由1~2分子具有不同碳鏈長度的脂肪酸構成。我們利用羧基活化劑TSTU可以將鼠李糖脂脂肪酸鏈的
5、末端羧基活化,生成Ⅳ-琥珀亞胺活潑酯,與腫瘤細胞表面蛋白的氨基反應,二者形成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而將鼠李糖脂連接到腫瘤細胞表面。
第三章中我們利用硅膠柱純化得到單鼠李糖脂(R1)和雙鼠李糖脂(R3)的混合物。根據親和層析原理,純化得到人anti-Rhamnose IgG抗體,并且制備了FITC標記anti-Rhamnose IgG抗體。另外,我們合成Rhamnolipid的活化形式Rhamnolipid-TSTU。利用流式細胞
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