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文檔簡(jiǎn)介
1、羊痘(山羊痘和綿羊痘)是由羊痘病毒(CapripoxvirUS,CPV)感染山羊和綿羊等偶蹄動(dòng)物引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為A類傳染病,我國(guó)將其列為一類傳染病。 當(dāng)前痘病毒活載體疫苗的研究是一個(gè)熱點(diǎn)。痘病毒因其具有特異性,含有大量的復(fù)制非必需片段可以插入大片段的外源基因等特點(diǎn)而引起了研究者的高度重視。羊痘病毒基因組全長(zhǎng)150Kb,基因組結(jié)構(gòu)相當(dāng)龐大,含有多個(gè)復(fù)制非必需區(qū),可以供多種免疫源基
2、因的插入,進(jìn)而構(gòu)建成雙價(jià)、多價(jià)疫苗。而構(gòu)建羊痘病毒活載體疫苗,其首要的工作就是要進(jìn)行復(fù)制非必需片段的篩選。 本研究通過隨機(jī)克隆的方法,將提純后的羊痘病毒基因組 HindⅢ酶切,隨機(jī)克隆到pUC18質(zhì)粒中。通過限制性內(nèi)切酶片段電泳分析和序列測(cè)定分析結(jié)果表明,克隆得到6個(gè)不同大小的HindⅢ片段PUA、PUB、PUC、PUD、PUE、PUF。將它們和Genebank中登錄的羊痘野毒株P(guān)ellor(AY077835)株進(jìn)行同源性比較,
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